[发明专利]含骺板软骨细胞复方微胶囊制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种含骺板软骨细胞复方微胶囊制剂，其特征在于：包括新鲜骺板软骨细胞或永生化骺板软骨细胞；包括混合载体海藻酸盐－胶原蛋白－聚赖氨酸；包括液化剂柠檬酸钠；包括固化剂氯化钙；所述含新鲜骺板软骨细胞或永生化骺板软骨细胞数2×10⁶～8×10⁶；所述混合载体海藻酸盐－胶原蛋白－聚赖氨酸的组成为：海藻酸盐50到600重量份，胶原蛋白10到100重量份，聚赖氨酸1到10重量份；所述液化剂柠檬酸钠的量为2到20重量份；所述固化剂氯化钙为1到10重量份。 

2.根据权利要求1所述的含骺板软骨细胞复方微胶囊制剂，其特征在于：所述含骺板软骨细胞复方微胶囊储存在培养液当中或生理盐水中。 

3.根据权利要求2所述的含骺板软骨细胞复方微胶囊制剂，其特征在于：所述新鲜骺板软骨细胞为新鲜分离的骺板软骨细胞，或者是冻存复苏骺板软骨细胞。 

4.一种含骺板软骨细胞复方微胶囊制剂的制备方法，其步骤如下： 

（1）将50到600重量份的海藻酸钠称重，溶解；得微胶囊溶液； 

（2）将10到100重量份的胶原蛋白称重，溶解，得另一种微胶囊溶液； 

（3）将1到10重量份的聚赖氨酸称重，溶解，得另一种微胶囊溶液； 

（4）将2到20重量份的柠檬酸钠称重，溶解，得另一种微胶囊液化溶液； 

（5）将1到10重量份的氯化钙或氯化钡称重，溶解，得固化液； 

（6）将纯化的骺板软骨细胞按2×10⁶～8×10⁶数量，得细胞液；所述骺板软骨细胞为新鲜骺板软骨细胞或永生化骺板软骨细胞； 

（7）将所得细胞液和海藻酸钠和胶原蛋白溶液混合，并通过高压静电多头微囊液滴发生装置与所述固化液混合，固化成圆形或类圆形的微胶珠，微胶珠与步骤（3）所得聚赖氨酸溶液作用得强化的微胶珠，微胶珠再与步骤（4）所得柠檬酸钠作用，液化后得含骺板软骨细胞复方微胶囊制剂。 

5.根据权利要求4所述的含骺板软骨细胞复方微胶囊制剂的制备方法，其特征在于：所述高压静电多头微囊液滴发生装置包括：一个静电发生装置，所述静电发生装置上有正负两极，正极与微量注射装置的针头相连，负极与浸在所述固化液中的不锈钢钢圈相连接，注射装置内装有混合载体溶液和骺板软骨细胞，滴入所述固化液中形成微胶珠，所得骺板软骨细胞复方微胶珠沉降到容器的下部，再经聚赖氨 酸固化，柠檬酸钠溶液液化后得含骺板软骨细胞复方微胶囊，所述含骺板软骨细胞复方微胶囊储存在培养液当中或生理盐水中。 

6.根据权利要求5所述的含骺板软骨细胞复方微胶囊制剂的制备方法，其特征在于：所述新鲜骺板软骨细胞为新鲜分离的骺板软骨细胞，或者是冻存复苏骺板软骨细胞。 

7.根据权利要求6所述的含骺板软骨细胞复方微胶囊制剂的制备方法，其特征在于：所述冻存复苏骺板软骨细胞的制备方法为：从液氮罐中取出冻存管，迅速投入37℃温水中，并不时摇动，令其尽快融化；从水浴中取出冻存管，吸出细胞悬液，注入离心管并滴加10倍以上的培养液，混合后低速离心，洗涤3次，用台盼蓝染色检测细胞存活率，将纯化的骺板软骨细胞按2×10⁶～8×10⁶进行包裹，制得复苏后骺板软骨细胞复方微胶囊待用。 

8.根据权利要求1－3中任一项所述含骺板软骨细胞复方微胶囊制剂在制备用于骺板损伤或骺板切除后的填充和有效分泌的药物中的应用。