[发明专利]经耐受性筛选的肿瘤干细胞、其制法、应用和试剂盒及其抗原组合物、制法、应用和试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及肿瘤干细胞(TSC)及其制备方法、该肿瘤干细胞在制备抗肿瘤药物中的应用、制备该肿瘤干细胞的试剂盒，以及由该肿瘤干细胞得到的抗原组合物及其制备方法、由该肿瘤干细胞得到的抗原组合物在制备抗肿瘤药物中的应用、制备由该肿瘤干细胞得到的抗原组合物的试剂盒。

特别地，本发明涉及经耐受性筛选的肿瘤干细胞及其制备方法、该经耐受性筛选的肿瘤干细胞在制备抗肿瘤药物中的应用、制备该经耐受性筛选的肿瘤干细胞的试剂盒，以及由该经耐受性筛选的肿瘤干细胞得到的抗原组合物及其制备方法、由该经耐受性筛选的肿瘤干细胞得到的抗原组合物在制备抗肿瘤药物中的应用、制备由该经耐受性筛选的肿瘤干细胞得到的抗原组合物的试剂盒。

背景技术

目前肿瘤的治疗方法包括手术治疗、放射治疗和化疗。但现有的肿瘤治疗方法不能根治肿瘤。主要原因是构成肿瘤的细胞中含肿瘤干细胞，其具有干细胞的生物学特性，即自我更新、多潜能分化、高耐受性(例如对化疗药物的高耐药性及对放射治疗的高耐辐射性)，并且极少数的肿瘤干细胞还驱动肿瘤的形成。因此肿瘤干细胞是肿瘤发生和发展(肿瘤的生长、肿瘤产生耐受性、肿瘤复发和肿瘤转移等)的真正元凶。

现有技术已公开了通过从患者肿瘤中将肿瘤干细胞分离出来或从肿瘤细胞系体外筛选可以得到相应肿瘤干细胞。例如：Irving L.Weissman等从急性髓性白血病(AML)患者中分离筛选得到表达CD96(干细胞标志)的AML干细胞，参见“CD96是在人急性髓性白血病中的白血病干细胞特异性标记”，Irving L.Weissman等人，美国国家科学院院刊，第104卷第26期，第11008-11013页，2007年6月26日(Naoki Hosen，Christopher Y.Park，NaoyaTatsumi，Yusuke Oji，Haruo Sugiyama，Martin Gramatzki，Alan M.Krensky，and Irving L.Weissman，CD96 is a leukemic stem cell-specific marker in humanacute myeloid leukemia，PNAS，Jun.26，2007，vol.104，no.26：11008-11013.)；Xiu-wu Bian等从人星型胶质瘤细胞系U87分离培养出肿瘤干细胞，参见“人星型胶质瘤细胞系U87的分离和表征”，Xiu-wu Bian等人，癌症通讯，第265卷，第124-134页，2008年2月3日(Shi-cang Yu，Yi-fang Ping，Liang Yi，Zhi-hua Zhou，Jian-hong Chen，Xiao-hong Yao，Lei Gao，Ji Ming Wang，Xiu-wu Bian，Isolation and characterization of cancer stem cells from a humanglioblastoma cell line U87，Cancer Letters，Feb.3，2008，vol.265：124-134)。

此外，现有技术已经尝试使用免疫治疗方法来治疗癌症，即通过裂解肿瘤干细胞得到抗原，并将该抗原负载到患者的树突状细胞上。如此得到的靶向肿瘤干细胞的树突状细胞，可以用于治疗癌症。例如：WO 2008/039874中公开了从脑肿瘤中分离出干细胞样肿瘤细胞(stem-like cell)，然后将由其制备得到的抗原负载到该树突状细胞上，并用所得树突状细胞来治疗癌症的方法。

现有技术仅公开了如何得到相关的肿瘤干细胞，但并未教导对获取的肿瘤干细胞进行进一步处理。并且，现有技术的上述方法虽然以肿瘤干细胞为靶标，但是该方法仍然存在肿瘤在放疗和化疗后肿瘤耐受性尤其是耐药性增加、复发率和转移率高的问题。

发明内容

为了克服现有以普通肿瘤干细胞为靶标的癌症免疫治疗方法仍然存在肿瘤在放疗和化疗后肿瘤耐受性尤其是耐药性增加、复发率和转移率高的问题，本发明的目的是提供一种经耐受性筛选的肿瘤干细胞及其制备方法、该经耐受性筛选的肿瘤干细胞在制备抗肿瘤药物中的应用、制备该经耐受性筛选的肿瘤干细胞的试剂盒，以及由该经耐受性筛选的肿瘤干细胞得到的抗原组合物及其制备方法、由该经耐受性筛选的肿瘤干细胞得到的抗原组合物在制备抗肿瘤药物中的应用、制备由该经耐受性筛选的肿瘤干细胞得到的抗原组合物的试剂盒。