[发明专利]微生物-化学联合脱毒法制备含共轭亚油酸优质棉籽蛋白的方法

说明书

技术领域

本发明属饲料资源技术领域，涉及一种微生物-化学联合脱毒法制备含共轭亚油酸优质棉籽蛋白的方法。

背景技术

我国是一个产棉大国，目前，我国每年有1100万吨以上的棉籽，年可产棉籽饼粕600万吨以上，资源量全球第一。棉籽饼粕是棉籽经压榨或浸提法去油加工后的副产物，经压榨后的副产物为棉籽饼，浸提法加工后的副产物为棉籽粕。其营养成分依棉籽质量、加工方式和脱壳程度不同而异。其主要的特点：(1)粗蛋白含量高，棉籽饼粕通常含蛋白质38％～50％，与豆粕相比氨基酸含量不均衡，赖氨酸少，精氨酸含量特别高，但棉籽粕是饲料中色氨酸、蛋氨酸的优良来源。(2)棉籽饼粕粗纤维含量随去壳及脱绒程度而不同，有效能值也随之变化。通常与豆粕相比粗纤维含量较高，而能值为豆粕的65％。(3)棉籽饼粕维生素E和B族维生素含量丰富，钙少磷多。(4)蛋白质营养是氨基酸营养和小肽营养，以小肠可吸收肽的形式(二肽和三肽)为动物供应氨基酸对于提高饲料蛋白质利用率具有潜在营养意义。所以，针对棉籽蛋白的营养特点，如果能够对其善加利用，可以缓解我国蛋白资源紧张的问题。

影响棉籽蛋白利用的一个重要原因是棉籽饼粕中含有游离棉酚，直接影响棉籽饼粕的饲用价值。棉酚多以脂腺体或树胶状存在于棉籽色素腺体中，通常占棉籽总量的0.7％~4.8％。游离棉酚毒性较大，可与酶或其他蛋白质结合，破坏其活性成分，降低蛋白质消化率，甚至使动物的组织器官发生病理变化，从而导致动物生长迟缓、中毒及死亡。

共轭亚油酸具有抗癌、促进生长、抑制脂肪累积、增强机体免疫能力等功能，能提高猪、禽生长速度和瘦肉率，是当前药物、保健食品和动物营养等学科的研究热点。但由于共轭亚油酸价格昂贵，饲料中添加成本过高，生产实践中应用不多。因此，动物营养与饲料学家正在寻求其它提高畜产品中共轭亚油酸含量的适用、低成本方法。

游离棉酚脱毒的方法主要有物理、化学、微生物发酵。本发明将化学法和微生物发酵法有机的结合起来，并使用能产共轭亚油酸的植物乳杆菌，生产含共轭亚油酸、肽和多种氨基酸的功能性优质棉籽蛋白，在国内尚无报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：旨在解决棉籽蛋白中游离棉酚的毒性，改善棉籽蛋白营养成分，并提供植物乳杆菌的发酵制备富含共轭亚油酸的优质棉籽蛋白的方法，以提高棉籽蛋白在饲料中的添加量，缓解蛋白资源紧张的问题。

该微生物-化学联合脱毒法制备含共轭亚油酸优质棉籽蛋白的方法是：先将热带假丝酵母和植物乳杆菌批量扩培后，再将棉籽蛋白去杂粉碎后，在棉籽蛋白粉中添加硫酸铁、麸皮、碳水化合物、植物油脂和水，混合搅拌均匀消毒灭菌后，将植物乳杆菌和假丝酵母菌株培养液接种到棉籽饼(粕)中，控温发酵。

下面结合具体实例对本发明做进一步说明

具体实施方式：

1、菌种的培养

1)斜面活化培养：土豆100g，加500ml水煮沸30min再补水至500ml，10g葡萄糖，10g琼脂。28℃恒温培养48h。

2)种子液制备：取2环新鲜斜面菌种接入种子培养液，28℃恒温摇床培养48h，转速250r/min。

2、用种子发酵液对固体发酵底物培养基进行固体发酵

将棉籽蛋白与麸皮、玉米粉按70∶20∶10比例混合均匀成基础底物，加1000-2000PPM铁盐，并按1％-3％的比例加植物油脂，自然PH值，高温高压灭菌。冷却至28-30℃时加入种子发酵液，接种量为3-5％，静置培养3天。

3、烘干及粉碎得到产品

将培养的固体发酵产物，自然凉干至水份低于12％后粉碎制成成品。