[发明专利]牡丹的一种DNA指纹图谱及其获取方法与专用引物无效
| 申请号: | 200910077931.0 | 申请日: | 2009-02-04 |
| 公开(公告)号: | CN101532056A | 公开(公告)日: | 2009-09-16 |
| 发明(设计)人: | 王亮生;张晶晶;舒庆艳 | 申请(专利权)人: | 中国科学院植物研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12P19/34 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关 畅;任凤华 |
| 地址: | 100093北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 牡丹 一种 dna 指纹 图谱 及其 获取 方法 专用 引物 | ||
1.一种获取牡丹DNA指纹图谱的专用引物,由序列表的序列1所示的DNA和序列2所示的DNA组成。
2.一种获取牡丹DNA指纹图谱的方法,包括如下步骤:
1)提取牡丹的基因组DNA;
2)以基因组DNA为模板,利用权利要求1所述的专用引物进行PCR扩增;
3)将PCR扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,分离DNA标记,用EB染色显示牡丹的DNA指纹图谱。
3.如权利要求2所述的获取牡丹DNA指纹图谱的方法,其特征在于:所述步骤1)中,所述牡丹的基因组DNA来自牡丹的任何器官。
4.如权利要求3所述的获取牡丹DNA指纹图谱的方法,其特征在于:所述步骤1)中,所述牡丹的基因组DNA来自叶片。
5.如权利要求2至4中任一所述的获取牡丹DNA指纹图谱的方法,其特征在于:所述步骤2)中,PCR反应体系中,Mg2+的浓度为2-2.8mM,每条引物的浓度为0.2-0.4μM。
6.如权利要求5所述的获取牡丹DNA指纹图谱的方法,其特征在于:所述步骤3)中,电泳采用6.5-8.7%的聚丙烯酰胺凝胶。
7.一种获取牡丹DNA指纹图谱的试剂盒,含有权利要求1所述的专用引物。
8.如权利要求7所述的获取牡丹DNA指纹图谱的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括PCR反应的常规试剂和/或聚丙烯酰胺电泳的常规试剂和/或EB染色的常规试剂。
9.如权利要求8所述的获取牡丹DNA指纹图谱的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括聚丙烯酰胺、DNA聚合酶和Mg2+离子。
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