[发明专利]一种包被金黄色葡萄球菌蛋白的免疫磁性微球的制备方法及其应用无效
| 申请号: | 200910077290.9 | 申请日: | 2009-01-21 |
| 公开(公告)号: | CN101782578A | 公开(公告)日: | 2010-07-21 |
| 发明(设计)人: | 王树森 | 申请(专利权)人: | 王树森 |
| 主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543 |
| 代理公司: | 北京市德权律师事务所 11302 | 代理人: | 王建国 |
| 地址: | 100067 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 包被 金黄色 葡萄球菌 蛋白 免疫 磁性 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种包被金黄色葡萄球菌蛋白的免疫磁性微球的制备方法,其包括如 下步骤:
a将1~5体积份的磁性微球置入50体积份的金黄色葡萄球菌发酵裂解 液中;其中,磁性微球的制备方法为:
aa:将纤维素和甲基氧化吗啉溶液以重量比5~10:100混合均匀,其中 甲基氧化吗啉的含水量低于11%;
ab:将5~8重量份的FeCl2·4H2O溶于100重量份的去离子水中,加入 70~80重量份的聚乙二醇,之后加入100~110重量份质量浓度为15%的H2O2, 混合均匀后,加入6N的NaOH溶液调解pH值至10.5,溶液在50~60℃反应, 得到棕黑色磁流体;
ac:将步骤aa和ab制得的纤维素溶液和棕黑色磁流体以体积比3~8:1 混合加入到含有1~2.5%(质量浓度)Tween的10~15体积份的四氯化碳溶 液中,在8000~12000rpm转速下搅拌6~15分钟,之后在400~2500rpm下, 于45~60℃下搅拌50~120分钟,磁性分离磁性微球;
b向上述溶液中加入1~5体积份1~3%Tween和1~5体积份0.3~0.8% 的戊二醛溶液;
c向上述溶液中加入5~25体积份0.2~0.8%的NaBH4;
d磁性分离得到免疫磁性微球。
2.如权利要求1所述的免疫磁性微球的制备方法,其中,所述步骤b 中将溶液涡旋30~60分钟,静置40~80分钟。
3.如权利要求1所述的免疫磁性微球的制备方法,其中,所述制得的免 疫磁性微球的粒径为5~7微米。
4.如权利要求1所述的免疫磁性微球的制备方法,其中,所述制得的免 疫磁性微球保存在0.5%的NaN3溶液中。
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