[发明专利]木耳菌种的组织分离方法

权利要求书

1、一种木耳菌种的组织分离方法，包括：(1)将干木耳消毒并润湿；(2)剪取耳片组织块；(3)将耳片组织块用酒精灯火焰进行灭菌消毒；(4)将耳片组织块插入到分离培养基中进行恒温分离培养；(5)挑取新生长出的菌丝作为接种块接种至纯化培养基中进行纯化培养，即得；其中，上述各步骤都是在无菌条件下进行的操作。

2、按照权利要求1所述的组织分离方法，其特征在于：所述的木耳选自黑木耳[Auricularia auricula(L.)Underw.]、毛木耳[Auriculariapolytricha(Mont.)Sacc.]或皱木耳(Auricularia delicata(Fr.)Henn.)。

3、按照权利要求1所述的组织分离方法，其特征在于：步骤(2)中所述的耳片组织块按照以下方法得到：将耳片四周边缘去掉，剪取远离耳基没有筋的平坦部位多块，得到耳片组织块。

4、按照权利要求1所述的组织分离方法，其特征在于：所述的用酒精灯进行灭菌消毒是用无菌镊子夹取耳片组织块在酒精灯火焰的外焰中快速的来回穿梭2～3次，每次1～2秒。

5、按照权利要求1所述的组织分离方法，其特征在于：所述的耳片组织块的长度为0.4～0.6cm，宽度为0.1～0.3cm；优选的，所述的耳片组织块的长度为0.5cm，宽度为0.2cm。

6、按照权利要求1所述的组织分离方法，其特征在于：步骤(4)中所述的分离培养基由各以下组分配制而成：麦芽浸粉20g，琼脂18g，水1000ml；pH自然。

7、按照权利要求1所述的组织分离方法，其特征在于：所述的分离培养基是分装于5ml的离心管中，其装液量为1.8ml的斜面培养基。

8、按照权利要求1所述的组织分离方法，其特征在于：步骤(5)中所述的纯化培养基由以下各组分配制而成：麦芽浸粉20g，葡萄糖20g，琼脂18g，磷酸二氢钾3g，水1000ml；pH自然。

9、按照权利要求1所述的组织分离方法，其特征在于：所述的纯化培养基为平板培养基。

10、按照权利要求1所述的组织分离方法，其特征在于：步骤(5)中挑取新生长出的菌丝作为接种块将其插入到纯化培养基的内部，使接种块的1/4～1/3部位露出培养基表面即可。