[发明专利]一种中药组合物中四种成分的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及到一种中药组合物中四种成分的含量测定方法，该方法采用高效液相色谱法同时测定芍药苷、马钱苷、小檗碱、丹酚酸B的含量。

背景技术

中药是我国传统防治疾病的重要武器，千百年来，在我国人民的健康生活中发挥着重大的作用。随着现代科学技术的发展，传统中药也面临着现代化的问题。近年来，全世界对中药的认识也逐渐加深，开始重视，这表明中药国际市场的快速发展时期已经来临。当前，中药要进入世界市场，实现中药现代化，首当其冲是其质量的控制，而含量测定是质量控制最关键的部分。由于中成药中化学成分十分复杂，因此在检测前需要提取、分离、精制，又由于所含有效成分量甚微，故目前多采用色谱、光谱法进行检测。传统中药含量测定仪薄层扫描为主，薄层扫描的方法定量存在较大的误差。

现阶段的中药质量控制模式基本上是借鉴化学药品质量控制的模式，含量测定作为中药质量标准中的要害内容之一，对于有效成分制剂而言，可在很大程度上控制药品质量，但对于复方制剂采用多种不同提取方式或多条提取路线的工艺以及多个有效部位制成的新药而言，仅建立某单一成分的含量测定在很大程度上带有较大的片面性。虽然研究者越来越熟悉到中药新药工艺过程的控制对于质量控制的重要性，但是多数制剂的质量标准仍然不能全面反映制剂的过程控制结果，即难以全面控制中药制剂的质量。因此，从中药质量标准的技术要求方面，全面提高质量标准仍然有很大的发展空间。因此，从中药研究的技术要求方面，将来的新药研究有必要在质量标准中建立多指标含量测定，目的之一是实现对多数成份指标的控制，并将对中药制剂工艺过程的控制直接在质量标准中得到体现。即处方中含有多个明确有效成分的，或者处方中药味分别按不同路线提取等各种不同情况下，均有必要研究建立多个指标的含量测定。但是，这就对质量控制的效率带来了挑战，如果均采用快捷的薄层扫描定量，则准确度会较差，如果均采用色谱法测定，则非常耗费时间并且显著增加质量控制的成本，在同一色谱系统中同时测定几种成分，则是比较理想的质量控制方法。

专利ZL02146572.X公开了一种治疗冠心病室性早搏的药物组合物及其制备方法，本专利申请就是针对该中药组合物进行的质量控制方法研究。

发明内容

本发明的目的是提供一种中药组合物四种有效成分的含量测定方法。

该中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参45-180份、麦冬50-200份、山茱萸125-450份、丹参125-450份、炒酸枣仁95-400份、桑寄生95-400份、赤芍45-200份、土鳖虫35-150份、甘松45-200份、黄连25-90份、南五味子35-150份、龙骨75-300份。

在质量控制方面，本发明提供的测定方法可同时测定该中药组合物的芍药苷、马钱苷、小檗碱和丹酚酸B四种成分的含量，方法简便可行、测定结果准确可靠。

本发明的含量测定方法如下：

色谱条件与系统适用性试验：

色谱柱为C18柱，规格为250mm×4.6mm，流动相A为0.18％甲酸/甲醇，B为0.30％甲酸/水，洗脱梯度：0～15min，流动相A由5％增至20％；2～7min，流动相A保持20％；7～37min，流动相A由20％增至35％；37～47min，流动相A由35％增至42％；47～50min，A保持42％；检测波长为230nm，流速：1.0mL/min，柱温：30-50℃；芍药苷、马钱苷、小檗碱、丹酚酸B与各自相邻峰的分离度均大于1.5；

对照品溶液的配制：

精密称取芍药苷对照品、马钱苷对照品、小檗碱对照品、丹酚酸B对照品，加甲醇分别制成每1ml含芍药苷0.10mg，马钱苷0.04mg，小檗碱0.08mg，丹酚酸B0.16mg的混合溶液，即得；

供试品溶液配制：

取本中药组合物制剂，必要时去除胶囊壳或包衣，研细，充分混匀，取0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇50ml，密塞，称定重量，超声30min，放冷，用70％甲醇补足重量，摇匀，取2ml，0.22μm微孔滤膜过滤，即得；

测定方法：

将对照品混合溶液和供试品溶液分别注入液相色谱仪，对照品混合溶液进样量10μL，供试品液进样量为20μL，记录色谱峰面积，外标法计算含量。

采用本发明方法测定含量，所述中药组合物中原料药的重量比优选为：