[发明专利]一种中药组合物中四种成分的含量测定方法

权利要求书

1.一种中药组合物中四种成分的含量测定方法，该四种成分分别为芍药苷、马钱苷、小檗碱、丹酚酸B，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参45-180份、麦冬50-200份、山茱萸125-450份、丹参125-450份、炒酸枣仁95-400份、桑寄生95-400份、赤芍45-200份、土鳖虫35-150份、甘松45-200份、黄连25-90份、南五味子35-150份、龙骨75-300份，其特征在于，该方法采用高效液相色谱的方法进行测定，色谱条件及测定方法如下：

色谱条件与系统适用性试验：

色谱柱为C18柱，规格为250mm×4.6mm，流动相A为0.18％甲酸/甲醇，B为0.30％甲酸/水，洗脱梯度：0～15min，流动相A由5％增至20％；2～7min，流动相A保持20％；7～37min，流动相A由20％增至35％；37～47min，流动相A由35％增至42％；47～50min，A保持42％；检测波长为230nm，流速：1.0mL/min，柱温：30-50℃；芍药苷、马钱苷、小檗碱、丹酚酸B与各自相邻峰的分离度均大于1.5；

对照品溶液的配制：

精密称取芍药苷对照品、马钱苷对照品、小檗碱对照品、丹酚酸B对照品，加甲醇分别制成每1ml含芍药苷0.10mg，马钱苷0.04mg，小檗碱0.08mg，丹酚酸B0.16mg的混合溶液，即得；

供试品溶液配制：

取本中药组合物制剂，必要时去除胶囊壳或包衣，研细，充分混匀，取0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇50ml，密塞，称定重量，超声30min，放冷，用70％甲醇补足重量，摇匀，取2ml，0.22μm微孔滤膜过滤，即得；

测定方法：

将对照品混合溶液和供试品溶液分别注入液相色谱仪，对照品混合溶液进样量10μL，供试品液进样量为20μL，记录色谱峰面积，外标法计算含量。

2.如权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参89份、麦冬112份、山茱萸224份、丹参224份、炒酸枣仁186份、桑寄生186份、赤芍89份、土鳖虫75份、甘松89份、黄连45份、南五味子67份、龙骨149份。

3.如权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参45份、麦冬112份、山茱萸224份、丹参225份、炒酸枣仁186份、桑寄生186份、赤芍89份、甘松45份、土鳖虫35份、黄连45份、南五味子67份、龙骨149份。

4.如权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参90份、麦冬135份、山茱萸270份、丹参200份、炒酸枣仁150份、桑寄生150份、赤芍100份、土鳖虫100份、甘松95份、黄连60份、南五味子75份、龙骨150份。

5.如权力要求1-4所述的含量测定方法，其特征在于，该中药组合物的活性成分由下列步骤制成：

a)人参加70％乙醇回流提取三次，合并提取液，滤过，浓缩，烘干，粉碎成的细粉；

b)南五味子、山茱萸、丹参、黄连、甘松共同加70％乙醇回流提取3次，合并提取液，滤过，浓缩的浸膏；

c)土鳖虫粉碎成的细粉；

d)麦冬、炒酸枣仁、桑寄生、赤芍、龙骨加水煎煮2次，合并提取液，浓缩的浸膏；

e)将步骤b)与d)所得浸膏合并，加入步骤c)所得的药物细粉，烘干，粉碎成细粉，加入步骤a)所得药物细粉，混匀即得该中药组合物活性成分。

6.如权利要求1-4中任一项所述的含量测定方法，其特征在于，所述中药组合物的制剂剂型为胶囊剂、片剂、冲剂、散剂或口服液制剂中的一种。