[发明专利]叶酸-长春新碱靶向缓释纳米微球及制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种靶向缓释纳米微球及制备方法及用途。

背景技术

眼眶腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma，ACC)是最常见的泪腺恶性上皮性肿瘤，其恶性度高，预后不佳已被公认^[1]。传统治疗方法为眶内容剜除术，但术后复发率仍高。近年来，包括放疗、化疗在内的综合治疗方法逐步应用于ACC，一定程度上降低了复发率，但患者的十年生存率仅为20％。此癌常发生于年轻人，严重损害了劳动力。同时，眶内容剜除术给患者带来的毁容之苦、放化疗引起的诸多并发症不仅使患者难于坚持治疗，而且严重降低了患者的生存质量。因而寻找一种安全有效的ACC治疗药物，具有重要的临床实用价值和良好的社会效益。

研究证明，药物制剂的给药途径与方法对药物的作用至关重要。常规的全身性系统化疗往往无法在肿瘤组织中达到有效的药物浓度，一味加大用药剂量势必导致诸多并发症，使患者不能耐受。而瘤内注射化疗(intra-tumoral injection chemotherapy)是将化疗药物直接注入肿瘤内，使肿瘤细胞长时间与高浓度的抗肿瘤药物接触，提高治疗效果，而且全身副作用少。国内、外已有多家报道^[2，3]采用瘤内注射化疗药物治疗脑胶质瘤、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、消化系统肿瘤、骨肿瘤等恶性实体性肿瘤，效果显著。目前治疗眼部肿瘤尚属空白。

但是瘤内注射也存在局限性。常规化疗药物注射后易随组织间隙弥散和体内代谢，靶区内难形成持久的药物高浓度区，不能持久发挥抗癌效果。多次给药会增加局部损伤。并且，化疗药物多具有局部组织刺激性，药物渗漏必然导致周围组织损伤。

综上，如何实现药物对ACC细胞特异性而持久的杀伤作用，提高化疗效果和安全性，成为ACC局部化疗的关键问题，因而具有重要的临床实用价值和意义。前期基础研究结果^[4]表明长春新碱(Vinscristine，VCR)为ACC-2细胞系特异敏感性药物，通过荷瘤裸鼠体内实验证实瘤内注射化疗效果优于全身给药，且全身副作用少。

腺样囊性癌临床常用的治疗方法包括手术、放射治疗和化学药物治疗，其中化学药物治疗起着重要的作用。但是，化疗药物必须达到一定浓度才能有效的杀伤肿瘤细胞，加大给药剂量可以提高血药浓度，但其毒副作用也同时增加。如何在增加靶细胞药物浓度的同时不增加甚至降低正常组织的药物浓度，是肿瘤化疗急需攻克的难题。

上世纪初，Enrich首先提出了“靶向治疗”的设想，即用对特定组织细胞有亲和力的载体定向，把效应剂如：毒素、化疗药物、放射性核素等携带到病灶部位发挥作用，减少对周围正常组织的损伤，称为主动靶向。载体可以是抗体、细胞因子、可溶性受体等。随着单克隆技术的建立，大量只识别特异性抗原决定簇的单克隆抗体(mono-clonal antibody，McAb)成为药物靶向部分的首选对象。但是药物与抗体等生物活性分子结合的稳定性差，结合后改变了二者的分子大小、表面电荷及受体结合部位的性质，这些都可能降低药效及靶向性。此外，McAb制备工艺复杂，产量少，依赖抗体靶向治疗需要较高的成本。抗体等载体的药物携带能力也较弱，每分子抗体仅携带约1～62分子的少量药物。要想获得携带药物多、高特异性、高稳定性McAb导向药物，需要引入新的载体。目前，PLGA(聚乳酸-羟基乙酸(poly(lactic-co-glycolic)acid，PLGA))是FDA批准用于注射剂的可生物降解高分子聚合物，已广泛应用于药物载体中。

配体靶向是指利用配体对病灶表面受体的特异性识别功能，将配体与载药纳米粒子结合，通过配体-受体介导达到对病灶(靶)部位的有效治疗。配体靶向主要包括叶酸、转铁蛋白、多肽、生长因子等。

叶酸是一种小分子量的具有喋呤结构的维生素。叶酸受体是一种通过聚糖磷脂酞肌醇(GPI)锚在膜上的糖蛋白，它能在生理条件下通过吞噬作用将叶酸摄取入细胞内。叶酸对叶酸受体具有高度特异的亲合性，从而克服了其穿透性低的障碍。与抗体相比，叶酸对叶酸受体的亲和力比单克隆抗体对肿瘤细胞表面的受体的亲和力强100倍以上，且叶酸具有免疫原性低、易于修饰、体积小、易穿透肿瘤、化学和生物稳定性高、成本低、易贮存等优点。叶酸受体在绝大多数正常组织中几乎不表达，而主要在癌细胞上得到高水平的表达。

参考文献：

[1]唐东润，宋国祥，孙丰源，等.眼眶泪腺腺样囊性癌手术联合放疗的疗效观察.眼科研究，2002；20：69-71.