[发明专利]一种祖师麻总香豆素提取物的制备方法和含量测定方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，主要涉及一种祖师麻总香豆素提取物的制备方法和含量测定方法。

背景技术

祖师麻为瑞香科(Thymelaeaceae)瑞香属植物黄瑞香(Daphne giraldiiNitsche)的根皮和茎皮，具有祛风通络、祛瘀止痛之功效，常用于治疗关节风湿痛等症。民间用于治疗头痛、牙痛、风湿性关节炎、跌打损伤、胃痛、肝区痛及支气管炎等症，俗称“打的满地上爬，离不开祖师麻”。现代药学研究表明：祖师麻含有多种化学成分，如香豆素类(瑞香素和瑞香苷等)、二萜类(瑞香毒素，12-羟基瑞香毒素，黄瑞香甲素，黄瑞香乙素、黄瑞香丙素等)、木质素类((±)-丁香树脂醇，(-)-松脂酚，(-)-二氢芝麻素，(-)-落叶松树脂醇等)、黄酮类、蒽醌类及甾醇类等化学成分。其中，香豆素类成分具有较好的镇痛、抗急性炎症和抗佐剂性关节炎作用，可广泛用于缓解和治疗各类疼痛、风湿类风湿性关节炎、关节扭伤挫伤等疾病。

中国发明专利申请CN1883618A公开了一种祖师麻有效部位及其制备方法与应用，该祖师麻有效部位含有药物有效成分祖师麻甲素(即瑞香素)、西瑞香素和瑞香辛，总香豆素含量为50％～90％。但该专利申请中制备的提取物中杂质含量高且多为黄酮类化合物，在单用分光光度法测定香豆素类化合物含量时，由于黄酮类化合物在总香豆素测定的波长下是有吸收的，导致香豆素类化合物的含量检测不准确，有效成分香豆素类化合物实际含量偏低。

发明内容

因此，本发明的目的在于提供一种祖师麻总香豆素提取物的制备方法，该制备方法的提取工艺经过进一步优化，制得的祖师麻总香豆素提取物组成明确，杂质含量低，有效成分含量更高，药效更强，从而降低了服用剂量，减少了副作用。

用于实现本发明上述目的的技术方案如下：

一种祖师麻总香豆素提取物的制备方法，其中包括以下步骤：

(1)以祖师麻药材为原料，水或C₁～C₅低级醇水溶液为溶剂进行提取，制得浸膏；

(2)将浸膏与固体稀释剂混合，加入有机溶剂进行提取，回收溶剂得到固体提取物；或者将浸膏加水悬浮，加入有机溶剂进行萃取，回收溶剂得到固体提取物；

(3)将固体提取物加水悬浮，采用大孔吸附树脂层析，首先以水或C₁～C₅低级醇水溶液为流动相淋洗除杂质，然后以C₁～C₅低级醇水溶液洗脱，收集洗脱液；

(4)前半部分洗脱液回收溶剂得到固体，即一部分祖师麻总香豆素提取物；后半部分洗脱液回收溶剂得到的固体加水混悬，再用有机溶剂萃取，有机层回收溶剂得到固体，即另一部分祖师麻总香豆素提取物。

在上述制备方法的步骤(1)中，提取的方法优选为回流或渗漉；C₁～C₅低级醇水溶液的低级醇浓度可以为0～95％(体积/体积)，优选为30～70％(体积/体积)。

在上述制备方法的步骤(2)中，有机溶剂优选为醋酸乙酯、正丁醇和/或水饱和正丁醇。优选地，上述制备方法的步骤(2)为将浸膏与固体稀释剂混合，加入有机溶剂进行提取，回收溶剂得到固体提取物；其中，固体稀释剂可以选自淀粉、微粉硅胶、硅藻土、高岭土、活性炭和白陶土中的一种或多种。

在上述制备方法的步骤(3)中，大孔吸附树脂可以选自苯乙烯、苯乙烯-丙烯酸酯、二苯乙烯、丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯型树脂中的一种或多种，例如D101、D201、DA201、HPD300、HPD400、HPD800、FL-1、FL-2和/或AB-8树脂，优选为苯乙烯型或苯乙烯-丙烯酸酯型大孔吸附树脂；淋洗除杂质使用的低级醇水溶液的低级醇浓度可以为0～50％(体积/体积)，优选为0～20％(体积/体积)；洗脱树脂使用的低级醇水溶液的低级醇浓度可以为20～90％(体积/体积)，优选为20～50％(体积/体积)。

在上述制备方法的步骤(4)中，后半部分洗脱液萃取采用的有机溶剂优选为醋酸乙酯和/或正丁醇。