[发明专利]一种检测有机磷农药的化学发光方法

说明书

技术领域

本发明属于农药残留分析领域和化学发光分析技术领域，具体涉及一种检测有机磷农药的化学发光方法。

背景技术

有机磷农药是含有C-P键，或C-O-P，或C-S-P，或C-N-P键的有机化合物。1938年德国发现有机磷有强大的杀虫效果后，开始广泛应用于农业。我国从1956年开始研制生产有机磷农药，现已能生产出40多个品种以供应国内市场，已成为世界农药生产大国之一。自1983年我国开始禁用了六六六和滴滴涕等有机氯农药后，有机磷农药成为我国使用量最大的农药。目前，我国农药市场上的农药品种主要有有机磷农药、氨基甲酸酯类农药、拟除虫菊酯类农药和生物农药。由于价格和使用习惯等各种因素，有机磷农药仍是主要的农药品种。

由于有机磷农药的广泛应用，导致食品发生了不同程度的农药残留污染。

有机磷农药对人的毒性属于神经毒，可经过皮肤、呼吸道和肠胃道吸收中毒，特别是脂溶性有机磷农药溶液经皮肤吸收更快。主要作用是抑制体内的胆碱酯酶，使在神经连接点为实现神经传递而产生的乙酰胆碱不能水解为乙酰胆碱，从而造成因乙酰胆碱在体内大量堆积而引起乙酰胆碱中毒。引起人体神经功能的紊乱，导致副交感、交感及神经系统的抑制及副交感节后神经的兴奋。此外，有机磷农药在生物体内往往会氧化成比原来毒性大的化合物。例如甲拌磷、乙拌磷等农药代谢为甲砜和乙砜，毒性比原体物更大。

目前为止，国内外用于检测有机磷农药残留的方法主要有气相色谱法、液相色谱法、免疫分析法、酶抑制法、生物传感器法等。

1、气相色谱法因其高选择性、高效能、高灵敏度、速度快、应用广、样品用量少、能同时分离分析多组分混合物、易于自动化等特点，在有机磷农药残留量分析中的应用最为广泛，方法成熟；但是对于沸点高或热稳定性差的农药不能直接进行分离检测，需进行衍生化处理。这样就不可避免地增加了样品前处理的难度，不利于农药检测的灵活应用和快速掌握；同时GC在农药残留分析中的通用性也比较差。

2、高效液相色谱法虽有高分离效能、高灵敏度等优点。但与气相色谱法一样其设备都比较大型、昂贵，成本较高。加之流动相多数是用有毒的溶剂，如乙腈、甲醇等，对实验室人员和环境也造成了一定的危害。而且高效液相色谱所需分析时间长，需要对样品进行前处理，样品的前处理过程往往比较复杂，不利于快速检测。

3、利用免疫分析法检测有机磷农药的前提和关键是制备好特异性的抗体，有机磷农药属于小分子物质，必须与大分子物质(如蛋白质)联结，才能用作免疫原。而免疫原的制作复杂，不易得到，因此免疫分析法在测定有机磷农药应用上具有一定的局限性。

4、利用生物传感器测定有机磷农药虽然简便、快速、灵敏，但是以乙酰胆碱酯酶对同一类的有机磷农药具有同样的抑制作用，因此这类传感器选择性不高.并且酶很不稳定，存在失活现象，有机磷农药对酶的抑制是不可逆的，酶电极不能重复使用，成本极高.酶抑制法灵敏度低，一般只适用于定性和半定量检测.

现有技术方法由于检测灵敏度低和分析操作复杂性、仪器昂贵等不利因素受到很大的限制，所以急需寻找一种能检测有机磷农药的快速、简便、灵敏度高、可靠、低成本的方法。

化学发光(Chemiluminescence，简称CL)，即化学发光物质经催化剂的催化或氧化剂的氧化后，形成一个激发态的中间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时，同时发射出光子，可以利用发光测量仪测量光量子产额。由于具有灵敏、简便、快速、低成本等优点，近年来，化学发光分析法在农药残留分析上的研究应用备受关注。化学发光法检测有机磷农药是以发光物质鲁米诺(Luminol)、光泽精(Lucigenin)等与有机磷农药进行一些特殊的化学反应，反应的中间体或反应产物吸收了反应所释放出的化学能而跃到激发态，当重新回到基态时，放出光子，光子通过光电倍增管和放大器后，转变为电流，并被放大，在一定条件下，电流大小与有机磷农药的浓度成正比。