[发明专利]一种高亲和力的抗CD20单克隆抗体

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程产品领域，更具体地，本发明公开了一种具有高亲和力的抗CD20单克隆抗体和其在制备抗肿瘤药物中的用途。

背景技术

恶性肿瘤是当今世界严重危害人类健康的疾病，在各种疾病所致死亡中高居第二位。非霍奇金淋巴瘤(Non Hodgkin’s lymphoma，NHL)是临床最常见的淋巴系统恶性肿瘤，其中B细胞来源的约占85％，好发于青壮年，发病率和病死率呈逐年上升趋势。根据病情特点，NHL可分为低、中、高三度。其中低度和部分中度NHL病程进展缓慢，统称为惰性NHL。它们对首次化疗敏感，但很容易复发或耐药，当再次化疗或放疗时，疗效明显降低，因而被认为是难以治愈的恶性肿瘤。近年来，单克隆抗体及其导向治疗NHL的临床试验研究取得了重大进展，其中被广泛使用且富有成效的是抗CD20的单抗制剂。CD20抗原是一种B细胞分化抗原，仅位于前B细胞和成熟B细胞，它在95％以上的B细胞性淋巴瘤中表达，且表面密度很高，而在造血干细胞、血浆细胞和其他正常组织中不表达。更为重要的是，CD20分子在与单克隆抗体结合后，无显著内化及脱落，故成为治疗B细胞淋巴瘤的理想靶点[Sacchi S，Federico M，Dastoli G，Fiorani C，Vinci G，Clo V，Casolari B.Treatment of B-cell non-Hodgkin’s lymphoma with anti CD 20 monoclonal antibodyRituximab.Crit Rev Oncol Hematol，2001，37(1)：13-25]。

目前采用抗CD20抗体治疗非霍奇金淋巴瘤已取得了较好的疗效。Rituxan(Rituximab，C2B8)为美国基因科技公司研制的以CD20为靶点的单克隆抗体，它是一种人鼠嵌合基因工程抗体，包含了鼠单克隆抗体的可变区基因和人抗体的恒定区基因[Reff ME，Carner K，Chambers KS，Chinn PC，Leonard JE，Raab R，Newman RA，Hanna N，Anderson DR.Depletionof B cells in vivo by a chimeric mouse human monoclonal antibody to CD20.Blood.1994，83(2)：435-45]。Rituxan已于1997年11月获FDA的批准上市，用于复发性或顽固性低度或滤泡性非霍奇金淋巴瘤的临床治疗[Leget GA，Czuczman MS.Use of rituximab，the new FDA-approved antibody.Curr Opin Oncol.1998；10：548-551]。尽管C2B8抗体在临床治疗中已显示出较好的疗效，仍有52％的病人对C2B8治疗不产生反应。因此，寻求更为有效用于治疗B淋巴瘤的CD20抗体药物显得尤为迫切。

最新的实验数据表明，对Rituximab耐受的细胞通常变现为：CD20表达减低；细胞内Bcl-2表达量增高等[Title：Development of Rituximab-Resistant Lymphoma Clones withAltered Cell Signaling and Cross-Resistance to Chemotherapy.Author：Jazirehi，A.R.；Vega，M.I.；Bonavida，B.Source：Cancer Research，2007，67(3)：1270-1281；Title：Acquirement ofRituximab Resistance in Lymphoma Cell Lines Is Associated with Both Global CD20 Gene andProtein Down-Regulaion Regulaed at the Pretranscriptional and Posttranscriptional Levels.Author：Czuczman，M.S.；Olejniczak，S.；Gowda，A.(...)Source：Clinical Cancer Research，2008，14(5)：1561-1570]。而抗体亲和力的提高能够增强抗体的特异性，提高检测灵敏度，增强抗体的功能同时降低抗体的用量。因此，通过在临床上广泛使用具有较好治疗效果的Rituximab的基础上，通过有限的几个突变，显著的提高Rituximab的亲和力，从而提高Rituximab对肿瘤的杀伤效果。

发明内容