[发明专利]一种抗腹泻多价卵黄免疫球蛋白的制备方法

权利要求书

1.一种抗腹泻多价卵黄免疫球蛋白的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)蛋鸡的免疫：运用免疫学方法，将大肠埃希氏杆菌和人轮状病毒制成疫苗后同时对蛋鸡进行免疫，均可在鸡血清和蛋黄中产生高效价的抗体，并维持35-50天左右不发生较大幅度的降低，当鸡蛋中抗体效价出现较大程度的降低时，通过追加免疫使其效价恢复到接近最高水平，且可持续50天左右，收集鸡蛋制备具有抗腹泻功能的多价卵黄免疫球蛋白；

(2)抗腹泻多价卵黄免疫球蛋白分离提纯：采用水稀释法将步骤(1)收集的鸡蛋的蛋黄进行脱脂处理，得到抗腹泻功能的多价卵黄免疫球蛋白溶液，将该溶液用5千膜浓缩4-8倍，然后在硫酸铵饱和度45-50％，pH值6.0-7.0的条件下盐析，将沉淀溶解后先后用5万膜和5千膜超滤，将盐析和超滤处理的产品经层析处理进一步纯化即得产品。

2.根据权利要求1所述的一种抗腹泻多价卵黄免疫球蛋白的制备方法，其特征在于，所述的步骤(1)中蛋鸡的免疫时间为：

(1)基础免疫：19周龄蛋鸡，1ml/羽接种，

(2)第一次加强免疫：基础免疫后14天，1.5ml/羽接种，

(3)第二次加强免疫：基础免疫后35天，1.5ml/羽接种，

(4)第一次追加免疫：基础免疫后112天，1.5ml/羽接种，

(5)第二次追加免疫：基础免疫后175天，1.5ml/羽接种。

3.根据权利要求1所述的一种抗腹泻多价卵黄免疫球蛋白的制备方法，其特征在于，所述的步骤(2)中的水稀释法是在蛋黄中加入水进行稀释浸提，然后进行离心分离脱脂，脱脂条件为：稀释倍数为8-10倍，pH值为5-6，浸提2小时，离心条件为5000rpm，30min。

4.根据权利要求1所述的一种抗腹泻多价卵黄免疫球蛋白的制备方法，其特征在于，所述的步骤(2)中的层析处理是采用SephadexG-200柱进行层析处理。