[发明专利]一种低聚原花青素的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种提取方法，具体的涉及一种低聚原花青素的提取方法。

背景技术

原花青素(Proantho Cyanidins，PC)广泛存在于植物中，其为一类由不同数量的黄烷-3-醇单体缩合而成的聚多酚类物质，主要由儿茶素和表儿茶素等组成，其因在酸性介质下加热生成相应的花色素而得名。最简单的原花青素是儿茶素与表儿茶单体。此外，还有二聚体、三聚体、四聚体等，直至十聚体。按聚合度大小，通常将2～4聚体称为低聚体(oligomeric procyanidin，OPC)，将五聚体以上称为高聚体(polymeric procyanidin，PPC)。低聚原花青素(oligomeric procyanidins，OPCs)由于结构特殊，水溶性好，有效性高，生物利用度在90％以上，易被人体吸收，成为研究的热点。低聚原花青素具有较强的抗氧化性、清除自由基能力和对人体微循环改善的能力，是目前发现的最强、最有效的氧自由基清除剂和脂质过氧化抑制剂之一。低聚原花青素在体内的抗氧化效果远高于维生素E和维生素C，其在体内抗氧化能力约为维生素E的50倍，维生素C的20倍。目前，低聚原花青素在化妆品领域以及保健食品领域得到广泛应用。国外生产的低聚原花青素制剂已成为人们经常服用的具有延缓衰老和美容等功能的保健食品。

国内外已报道了多种分离制备低聚原花青素的方法。这些方法主要是从松树皮、葡萄籽等植物提取物中分离得到。目前，低聚原花青素的提取纯化工艺主要包括溶剂提取法和柱层析法。溶剂提取法虽然设备简单，操作费用低，但仅采用溶剂提取法，产品纯度较低，只能达到50％左右。柱层析法可有效提高产品纯度。现有的采用柱层析法分离提纯低聚原花青素的报道中，主要采用聚酰胺或C₁₈键合相硅胶作为填料。其中，聚酰胺填料虽然价格较低，但是在进料前需要对原料进行复杂的预处理，并且由于聚合度较高的低聚原花青素在聚酰胺上有强烈吸附，使得低聚原花青素的收率较低，且很容易使柱效降低，需要用碱液频繁再生，不适合工业化生产。采用C₁₈键合相硅胶作填料，虽然可以得到纯度较高的低聚原花青素产品，但其价格昂贵，难以应用于大规模工业生产。因此，亟待寻求一种工艺简便，成本低，易于产业化的新方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了克服现有的低聚原花青素的方法产品纯度和收率不够理想，或操作繁琐，或成本较高等缺陷，而提供了一种与现有技术相比，产品纯度和收率均有显著提高，且工艺简便，成本低，易于产业化的提取低聚原花青素的新方法。

本发明的方法包括如下步骤：将含低聚原花青素的植物原料用溶剂提取所得的粗提物上大孔吸附树脂柱，用水洗脱除去蛋白质和多糖类杂质，之后再用下述有机溶剂中的一种或多种与水作为洗脱剂进行梯度洗脱：乙醇、甲醇和丙酮，收集以体积比为4∶1∶5的正丁醇、醋酸和水的混合溶液静置分层后的上层溶液为展开剂，硅胶薄层层析板(TLC)上Rf值为0.2～0.5的洗脱部分，即得低聚原花青素提取物。

下面，对本发明的方法进行详细的介绍：

(1)含低聚原花青素的植物原料用溶剂提取所得的粗提物

本发明中，所述的含低聚原花青素的植物原料用溶剂提取所得的粗提物可为现有技术中，植物原料经溶剂提取含有低聚原花青素的粗提物，本发明特别优选由下述原料及方法所制得的粗提物，以更佳的配合之后的提纯步骤：

本发明中，所述的含低聚原花青素的植物原料可为现有文献中报道的各种含有低聚原花青素的植物原料，如松树皮、葡萄籽和沙棘籽等。本发明优选低聚原花青素含量较高的沙棘籽，更佳的为沙棘提取完沙棘油后的沙棘籽渣滓，选择该原料可实现废物利用，且较松树皮和葡萄籽等来源更广，且成本更低。

较佳的，溶剂提取前，将上述植物原料进行干燥粉碎处理。干燥的温度较佳的为40～85℃。粉碎的颗粒的粒径较佳的为80目。