[发明专利]一种低聚原花青素的提取方法

权利要求书

1.一种提取低聚原花青素的方法，其特征在于其包括如下步骤：将含低聚原花青素的植物原料用溶剂提取所得的粗提物上大孔吸附树脂柱，用水洗脱除去蛋白质和多糖类杂质，之后再用下述有机溶剂中的一种或多种与水作为洗脱剂进行梯度洗脱：乙醇、甲醇和丙酮，收集以体积比为4∶1∶5的正丁醇、醋酸和水的混合溶液静置分层后的上层溶液为展开剂，硅胶薄层层析板上Rf值为0.2～0.5的洗脱部分，即得低聚原花青素提取物。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的含低聚原花青素的植物原料为松树皮、葡萄籽或沙棘籽。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的沙棘籽为沙棘提取完沙棘油后的沙棘籽渣滓。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的溶剂提取的方式为常规溶剂提取、微波辅助溶剂提取、超声溶剂提取或超临界流体萃取。

5.如权利要求1或4所述的方法，其特征在于：

所述的溶剂提取中，提取溶剂为下述有机溶剂中的一种或多种与水的混合溶剂：乙醇、甲醇、丙醇、丁醇、丙酮和乙酸乙酯；混合溶剂的浓度为体积百分比10～95％有机溶剂的水溶液；每次提取中，混合溶剂的用量为2～20ml/1g植物原料；溶剂提取的温度为10～100℃；溶剂提取的次数为2～5次；每次溶剂提取的时间为20分钟～5小时；

采用微波辅助溶剂提取时，采用恒功率或恒温的微波辐照方式；

采用超临界流体萃取时，超临界流体为CO₂，夹带剂选自甲醇、乙醇和丙酮中的一种或多种，或不使用夹带剂。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的大孔吸附树脂为下述类型的大孔吸附树脂：HP-20、HP-2MG、SP207、SP850、XAD16、XAD1600、XAD7HP、D-101、AB-8、MCI或HPD。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的大孔吸附树脂的径长比为1∶5～1∶45；大孔吸附树脂的用量为上样质量的30～120倍。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于：将粗提物上大孔吸附树脂柱的上样方法为湿法上样，以0.1～5倍柱体积/小时的流速上样进柱，上样温度为10～60℃。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的用水洗脱除去蛋白质和多糖类杂质的步骤中，水的用量为1～8倍柱体积，用水洗脱的流速为1～5倍柱体积/小时，用水洗脱的温度为10～60℃。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的梯度洗脱的洗脱梯度在体积比0％有机溶剂和体积比100％有机溶剂的浓度范围内选择，每个梯度的洗脱液的用量为5～20柱体积，洗脱的流速为1～5倍柱体积/小时，梯度洗脱的温度为10～60℃。

11.如权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述的大孔吸附树脂柱为D101大孔吸附树脂，所述的梯度洗脱中，洗脱梯度依次为：5％乙醇水溶液，40％乙醇水溶液，纯乙醇，收集40％乙醇水溶液的洗脱部分；

或者，所述的大孔吸附树脂柱为AB-8型大孔吸附树脂，所述的梯度洗脱中，洗脱梯度依次为：40％丙酮水溶液，纯丙酮，收集40％丙酮水溶液的洗脱部分；

或者，所述的大孔吸附树脂柱为HP-20大孔吸附树脂，所述的梯度洗脱中，洗脱梯度依次为20％甲醇水溶液，40％甲醇水溶液，纯甲醇，收集20％甲醇水溶液的洗脱部分，以及部分40％甲醇水溶液的洗脱部分；

或者，所述的大孔吸附树脂柱为SP207大孔吸附树脂，所述的梯度洗脱中，洗脱梯度依次为10％乙醇水溶液、50％乙醇水溶液，纯乙醇，收集10％甲醇水溶液的洗脱部分和部分50％甲醇的洗脱部分；

百分比为体积百分比。

12.如权利要求1所述的方法，其特征在于：将权利要求1的方法所制得的低聚原花青素提取物再进行凝胶柱分离提纯，以水、乙醇、甲醇、丙酮和氯仿中的一种或多种为洗脱剂，收集以体积比为4∶1∶5的正丁醇、醋酸和水的混合溶液静置分层后的上层溶液为展开剂，硅胶薄层层析板上Rf值为0.2～0.5的洗脱部分，即得进一步提纯后的低聚原花青素提取物。