[发明专利]一种检测氯霉素的酶联免疫试剂及方法

权利要求书

1.一种检测动物源性食品中氯霉素的酶联免疫试剂盒，其特征是，它含有：

(1)包被氯霉素抗原的酶联板或包被抗抗体的酶联板；

(2)酶标记物；

(3)氯霉素特异性抗体；

(4)氯霉素标准品溶液；

(5)底物显色液；

(6)终止液；

(7)浓缩洗涤液；

(8)浓缩复溶液；

试剂盒中氯霉素包被抗原是采用活泼酯法将氯霉素半抗原与牛丙种球蛋白进行偶联得到的，抗抗体为羊抗鼠抗抗体或羊抗兔抗抗体，羊抗鼠抗抗体是以鼠源抗体为免疫原对无病原体山羊进行免疫得到，羊抗兔抗抗体是以兔源抗体为免疫原对无病原体山羊进行免疫得到。

2.如权利要求1所述的检测动物源性食品中氯霉素的酶联免疫试剂盒，其特征是，试剂盒中酶标记物为酶标记抗抗体或酶标记氯霉素抗原，所用酶为过氧化物酶或半乳糖甘酶；酶标记物形式为冻干粉、浓缩液或工作液。

3.如权利要求2所述的检测动物源性食品中氯霉素的酶联免疫试剂盒，其特征是，所用的酶为过氧化物酶。

4.如权利要求2或3所述的检测动物源性食品中氯霉素的酶联免疫试剂盒，其特征是，试剂盒中酶标记抗原是采用活性酯法将标记酶与氯霉素半抗原进行偶联得到。

5.如权利要求4所述的检测动物源性食品中氯霉素的酶联免疫试剂盒，其特征是，试剂盒中氯霉素特异性抗体为鼠源单克隆抗体或兔源多克隆抗体，免疫原是采用活泼酯法将氯霉素半抗原与钥孔槭血蓝蛋白进行偶联得到的；抗体形式为冻干粉、浓缩液或工作液；抗体稀释液为pH值8.2、0.05mol/L、含有3％w/v马血清和5‰w/v明胶的磷酸盐缓冲液。

6.如权利要求5所述的检测动物源性食品中氯霉素的酶联免疫试剂盒，其特征是，试剂盒中当标记酶为过氧化物酶时底物显色液为过氧化氢或过氧化脲、四甲基联苯胺硫酸盐混合溶液、终止液为0.1-0.5mol/L的硫酸或盐酸缓冲液；当标记酶为半乳糖甘酶时，底物显色液为0.5mol/L磷酸钾缓冲液，终止液为2mol/L的柠檬酸缓冲液；浓缩洗涤液为去离子水或三蒸水；浓缩复溶液为去离子水或三蒸水。

7.如权利要求6所述的检测动物源性食品中氯霉素的酶联免疫试剂盒，其特征是，制备酶联板过程中所用的包被缓冲液为批pH值9.6、0.05mol/L的碳酸盐缓冲液；包被氯霉素抗原或抗抗体的载体物质为聚苯乙烯、纤维素、聚丙烯酰胺、聚乙烯、聚丙烯、交联葡聚糖、玻璃、硅橡胶或琼脂糖凝胶；载体的形式是试管、微量反应板凹孔、小珠或小圆片；洗涤液为去离子水或三蒸水；封闭液是含有15％-30％w/v的马血清和1％w/v惰性蛋白的溶液。

8.如权利要求1-3和5-7任一项所述的检测动物源性食品中氯霉素的酶联免疫试剂盒，其特征是，试剂盒中氯霉素标准品溶液为六个浓度梯度的氯霉素溶液，氯霉素稀释液为去离子水或三蒸水，氯霉素标准溶液浓度为：0μg/L、0.025μg/L、0.075μg/L、0.225μg/L、0.675μg/L、2.025μg/L，1-3ml/瓶。

9.如权利要求4所述的检测动物源性食品中氯霉素的酶联免疫试剂盒，其特征是，试剂盒中氯霉素标准品溶液为六个浓度梯度的氯霉素溶液，氯霉素稀释液为去离子水或三蒸水，氯霉素标准溶液浓度为：0μg/L、0.025μg/L、0.075μg/L、0.225μg/L、0.675μg/L、2.025μg/L，1-3ml/瓶。

10.一种检测动物源性食品中氯霉素的方法，包括以下步骤：

(1)样品前处理；

(2)用权利要求1-9任一所述的试剂盒进行检测；

(3)分析检测结果。