[发明专利]一种接骨七厘组合物及其制备方法

权利要求书

1.接骨七厘组合物，包括自然铜、土鳖虫、骨碎补、龙血竭、乳香、没药、当归、大黄、硼砂；其中乳香、没药、骨碎补、龙血竭、大黄、当归6位药材中至少一位的质量要求如下：

乳香药材中11-羰基-β-乙酰乳香酸含量不得少于1.0％，组合物中不得低于0.08％；

没药药材中β-榄香烯含量不得少于0.1％，组合物中不得低于0.008％；

骨碎补药材中柚皮苷含量不得少于0.3％，组合物中不得低于0.038％；

龙血竭药材含龙血素A和龙血素B含量之和不得少于0.6％，组合物中不得低于0.075％；

大黄药材含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量之和不得少于1.5％，组合物中不得低于0.125％；

当归中阿魏酸含量应不得低于0.05％，组合物中不得低于0.006％。

2.根据权利要求1所述的接骨七厘组合物，其特征在于：

1)乳香药材或组合物中11-羰基-β-乙酰乳香酸的含量测定条件如下：

色谱条件：HPLC法，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％水(79∶21)为流动相，检测波长为249nm；

对照品溶液制备：精密称取11-羰基-β-乙酰乳香酸对照品适量，加甲醇溶解制成约60μg/ml的溶液，即得；

供试品溶液制备：取组合物粉末约4g或乳香药材粉末0.4g，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇40mL，超声处理30min，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

2)没药药材或组合物中β-榄香烯的含量测定条件

色谱条件：气相色谱仪，FID检测器，载气氮气，HP-5MS毛细管石英柱，规格30m×0.25mm×0.25μm；升温程序：150℃，20℃/min，250℃；分流比50∶1，气化室温度250℃，检测器温度250℃；进样量2μl；

对照品溶液的制备：精密称取β-榄香烯对照品适量，以丙酮溶解制成1mg/ml的溶液，即为对照品溶液；

供试品溶液的制备：称组合物粉末约10g或没药药材粉末1.0g，精密称定，依2005年版《中国药典》一部提取没药挥发油，用无水Na₂SO₄脱水，取所得挥发油用丙酮溶解并稀释至10ml，作为供试品溶液；

3)骨碎补或组合物中柚皮苷的含量测定条件

色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.2％磷酸溶液(28∶72)为流动相；检测波长为283nm，理论板数按柚皮苷峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备：精密称取在110℃干燥至恒重的柚皮苷对照品10mg，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得，每1ml含柚皮苷40μg；

供试品溶液的制备：取组合物粉末约3g或骨碎补药材粉末0.4g，精密称定，取约1g，置具塞锥形瓶中，加水饱和的正丁醇40ml，超声处理2次，每次20分钟，滤过，用适量水饱和的正丁醇洗涤滤渣及容器，合并滤液及洗涤液，蒸干，残渣加甲醇溶解，并转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

4)龙血竭或组合物中龙血素A和龙血素B含量测定条件

色谱条件：HPLC法，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.4％磷酸溶液(34∶66)为流动相；检测波长为278nm，理论板数按龙血素B峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备：分别精密称取龙血素A和B对照品适量，加甲醇制成每1ml各含15μg的溶液，作为对照品混合溶液；

供试品溶液的制备：取组合物粉末约6g或龙血竭药材粉末0.8g，精密称定，精密称定，置锥形瓶中，加甲醇40ml，加热回流提取2小时，放冷，滤过，用少量甲醇分次洗涤药渣及锥形瓶，洗液一起并入50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得；

5)大黄或组合物中蒽醌类化合物的含量测定条件

色谱条件：HPLC法，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相∶甲醇-水-醋酸(90∶10∶1)；检测波长：254nm，理论板数按大黄素峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备：精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各80μg，大黄素甲醚40μg的溶液；分别精密量取上述对照品溶液各2ml，混匀，即得每1ml中含芦会大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各16μg，含大黄素甲醚8μg；

供试品溶液的制备：取组合物粉末约2g或大黄药材0.2g，置烧瓶中，精密加甲醇50mL，称重，浸泡1h，置水浴上回流1h，取下烧瓶，放至室温，称重，补足损失的重量，混匀，过滤，滤液即为供试品溶液或药材溶液；

6)当归或组合物中阿魏酸的含量测定条件

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-5％醋酸溶液(30∶70)为流动相；检测波长为320nm，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备：取经五氧化二磷减压干燥24小时后的阿魏酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取组合物粉末约3g或当归药材粉末0.4g，精密称定，研细，精密称取适量，置具塞锥形瓶中，加水50ml，回流提取1小时，滤过，滤液浓缩至约30ml时，加稀盐酸调节pH1～2，用乙醚振摇提取4次，每次30ml，合并乙醚液，挥干，残渣用甲醇溶解并转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。