[发明专利]一种无创性产前筛查21-三体综合征的试剂盒

权利要求书

1.一种无创性产前筛查21-三体综合征的试剂盒，试剂盒包括：(a)逆转录酶系及逆转录反应液、(b)杂交反应液、(c)耐热的连接酶和连接反应液、(d)可热启动的耐热DNA聚合酶和PCR反应体系、(e)质控品，其特征在于杂交反应液包括1.5M KCl和20mM Tris-Cl及探针混合物，其中使用的探针混合物的序列分别为，针对rs8130833位点的是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGAAAGCCTGTGTCCACTGTGGA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGAAGTAGTTGATGGAAATGAGGGAACACTCA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGTAAGCAAGTAGTTGATGGAAATGAGGGAACACTCT-3’；

针对rs7844位点的是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGAATATTGTCATCCGCTTGCTGTGCTGTGGGG-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGAAAAAGTAGAGGAAAAAGTGTGTGGTTAAG-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGCCCAGAAAAAGTAGAGGAAAAAGTGTGTGGTTAAT-3’；

针对rs9015位点的是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGAATCACTGCGCCTACTATACGCAAAAGGGCCCCTGG-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGCTCTGGTGAGAGAGAACAATAACAACAAAA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGAACTGCTCTGGTGAGAGAGAACAATAACAACAAAT-3’；

针对rs13643位点的是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGACCCAGTTCTGTAAATAACTTGAATCCAGTTGTCTTGTATA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGTTTTATTTAATATGTTTTTGGGTATATGTA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGGGTCATTTTATTTAATATGTTTTTGGGTATATGTG-3’；针对rs9305729位点的是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGATTTAAAATGGTTAAAATGGCTTTAAATGGTGACCAGCTTTGCATG-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGCCTTGGTTCTCGGTGATCTAGATAAAGTTA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGTGGTACCTTGGTTCTCGGTGATCTAGATAAAGTTG-3’。

2.根据权利要求1的试剂盒，其特征还在于PCR反应体系包括20mM Tris-Cl，20mM KCl，2mMMgCl₂，荧光染料标记的上游、下游寡核苷酸引物，其中上游和下游寡核苷酸引物的序列分别是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTG-3’。

3.根据权利要求1的试剂盒，其特征还在于杂交反应液中探针混合物浓度范围0.01fM-100fM。

4.根据权利要求1的试剂盒，其特征还在于PCR反应体系中上游、下游引物浓度范围为0.05μM-10.0μM。

5.根据权利要求1的试剂盒，其特征在于每人份PCR反应体系中加入2单位耐热DNA聚合酶’。

6.根据权利要求1的试剂盒，其特征还在于逆转录反应液包括50mM Tris-HCl，50mMKCl，4mM MgCl₂，10mM DTT及20pM市售的随机引物，每人份逆转录反应液中加入100单位逆转录酶。

7.根据权利要求1的试剂盒，其特征还在于连接反应液包括20mM Tris-HCl，24mMNaAC，15mM MgCl₂，每人份连接反应液中加入1单位连接酶。