[发明专利]一种细菌内毒素或热原检测的方法

说明书

技术领域

本发明涉及细菌内毒素或热原检测；特别是涉及一种应用超滤处理的细菌内毒素或热原检测的方法。

背景技术

细菌内毒素系存在与革兰氏阴性细菌细胞壁外膜中的脂多糖成分，在理化特性上属于兼具亲水性与疏水性的两性分子，携带正电与负电荷。内毒素是一类具有高度活性的分子，对机体具有广泛的生物学作用。内毒素对机体可引发一系列的毒害作用：是热原反应的主要诱因，一纳克的内毒素足以引起健康成人产生发热反应；白细胞数目改变(开始为白细胞减少，数小时后为白细胞增多)；皮肤炎症；休克和其它等。注射用的药物制剂(包括各种注射液、冻干粉针、注射用水等)、医疗器械(临床诊断产品、各种洗液、检验用试剂)、生化试剂等对细菌内毒素含量均有严格的限量规定。按照现有的中国药典、行业标准、其它技术标准中，对于细菌内毒素检查法，描述了操作的要求和注意事项，提出了通过稀释来控制对内毒素检查的干扰，但没有对待测样品进行细菌内毒素的分离制备、同时又去除影响内毒素检测的干扰成分等方法，因此，有些药物制剂，如清开灵注射液、其它天然药物(包括中药)注射制剂中，难以实施细菌内毒素的检查，没有细菌内毒素的检测指标。对于清开灵注射液，它本身具有清热解毒，化痰通络，醒神开窍的功效，是中医里用于高烧和上呼吸道感染的一线用药，但它在使用中常常发生过敏性休克、皮炎、高热等不良反应，这些都与清开灵注射液的细菌内毒素的质量控制密切相关。现行的中国药典中，对中药和其它药物注射剂，通过以家兔为供试动物的热原检查法，判断供试品中所含热原的限度是否符合规定，但当这些药物本身具有退热降温的功效时，所测定的结果往往不可靠，易出现假阴性的结果，如清开灵注射液在生产中就经常发生这种情形，导致成品制剂中的细菌内毒素和热原超过药典规定而未能检查出来，致使不合格品进入药品流通市场。

中国发明专利申请(申请号200510045847.2)“一种定量测定样品中内毒素浓度的判断方法”公开了一种定量测定样品中内毒素浓度的判断方法：将内毒素标准品和待测样品做系列稀释；将上述经过系列稀释的内毒素标准品和待测样品分别与鲎试剂反应，在内毒素测定仪上测得浊度值；该发明提出了定量测定样品中内毒素浓度的判断方法，定量给出了通过标准曲线来计算样品中内毒素浓度的试验误差，也可以与内毒素测定仪、动态比浊定量法配合使用，判断定量测定样品内毒素浓度的试验误差，从而提高了测定结果的准确性。