[发明专利]具有抗肿瘤活性的灵芝子实体提取物及其制备方法

权利要求书

1.一种具有抗肿瘤活性的灵芝子实体提取物，其特征在于，其中三萜 类成分的含量为30～70wt％；同时，该提取物中的有效成分还用以下方法表 征：用高效液相色谱条件1表征提取物，由色谱峰保留时间在80～128min之 间的成分组成；用高效液相色谱条件2表征提取物，包含色谱峰保留时间为 14.89～15.67min、30.74～31.35min、34.36～34.98min、37.03～37.64min、 39.47～40.01min的5个成分；

所述的高效液相色谱条件1为：ZORBAX SB-C18柱；流动相：A：乙腈， B：0.05％磷酸水溶液，线性梯度洗脱，0min：27％A；40min：27％A；60min：35％A； 80min：45％A；90min：65％A；100min：75％A；110min：85％A；120min：100％A； 128min：100％A；流速：1.0mL·min-1；检测波长：254nm；柱温：30℃；

所述的高效液相色谱条件2为：ZORBAX SB-C18柱(4.6mm×250mm， 5μm)；流动相：A：乙腈，B：0.05％磷酸水溶液，线性梯度洗脱，0min：60％A；25 min：90％A；40min：100％A；45min：100％A；流速：1.0mL·min-1；检测波长： 240nm；柱温：30℃；

该具有抗肿瘤活性的灵芝子实体提取物是指采用以下方法制备得到的 提取物：

(1)灵芝子实体粉碎成粗粉，过筛；

(2)将灵芝子实体粗粉以乙醇为夹带剂用超临界CO₂萃取技术进行萃取， 得到灵芝子实体粗提物乙醇溶液，减压回收溶剂，得到灵芝子实体粗提物；

(3)将灵芝子实体粗提物用醋酸乙酯溶解，饱和碳酸氢钠溶液萃取，分别 得到饱和碳酸氢钠层和醋酸乙酯层；

(4)取醋酸乙酯层减压回收溶剂，真空干燥，得灵芝子实体抗肿瘤提取物。

2.一种权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的灵芝子实体提取物的制备 方法，其特征在于，步骤如下：

(1)灵芝子实体粉碎成粗粉，过筛；

(2)将灵芝子实体粗粉以乙醇为夹带剂用超临界CO₂萃取技术进行萃取， 得到灵芝子实体粗提物乙醇溶液，减压回收溶剂，得到灵芝子实体粗提物；

(3)将灵芝子实体粗提物用醋酸乙酯溶解，饱和碳酸氢钠溶液萃取，分别 得到饱和碳酸氢钠层和醋酸乙酯层；

(4)取醋酸乙酯层减压回收溶剂，真空干燥，得灵芝子实体抗肿瘤提取物。

3.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的灵芝子实体提取物的制备 方法，其特征在于，

在所述步骤(1)中，灵芝子实体粉碎时，过10～50目筛；

在所述步骤(2)中，超临界CO2萃取条件为：萃取压力为25MPa，萃取 温度为45℃，萃取时间为1.5h，夹带剂乙醇用量为3mL·g^-1生药；灵芝子 实体粗提物乙醇溶液回收乙醇时，温度控制在30～60℃；

在所述步骤(3)中，用醋酸乙酯溶解时，灵芝子实体粗提物与醋酸乙酯两 者的比例为灵芝子实体粗提物质量(g)∶醋酸乙酯(mL)＝1∶10～1∶100；

在所述步骤(3)中，用饱和碳酸氢钠溶液萃取醋酸乙酯时，萃取次数为1～8 次；

在所述步骤(3)中，用饱和碳酸氢钠溶液萃取醋酸乙酯时，醋酸乙酯与饱 和碳酸氢钠溶液体积比为醋酸乙酯∶饱和碳酸氢钠溶液＝1∶3～3∶1；

在所述步骤(3)中，用饱和碳酸氢钠溶液萃取醋酸乙酯时，萃取次数为1～8 次。