[发明专利]一种头孢呋辛钠聚合物杂质的检测方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱(HPLC)检测方法，具体涉及一种以聚苯乙烯凝胶色谱 介质为分离载体的检测头孢呋辛钠中聚合物或缩合物杂质的分析方法。

(二)背景技术

β-内酰胺抗生素在临床中使用广泛，大量的实验以及临床实验都已证明其中各种聚合 物杂质(通常在本领域中将该类杂质称为“聚合物”，但从机理及结构分子量来讲应属二聚 缩合物，或三聚缩合物，或多聚缩合物，或不同缩合物的混合物，因此，下文兼采用“缩合 物”)是引起速发型过敏反应的真正过敏原，因此检测并控制产品中缩合物杂质的含量是减 少β-内酰胺抗生素过敏反应的根本途径[参见：金少鸿，胡昌勤，中国新药杂志，1994，3(4)， 38～41；胡昌勤，赵建西，金少鸿，孙学兰，中国抗生素杂志，1991，16(4)，270～275]。目 前该种杂质的检测以分子筛为原理的软凝胶色谱为主要方法[参见：胡昌勤，金少鸿，孙学兰， 中国抗生素杂志，1990，15(5)，357～362]，此种方法不需专门的杂质标准品进行对照，。中 国药典2000以及2005版也已增加了用此方法对缩合物的检查项[国家药典委员会，中华人民共 和国药典，2005年版，北京：化学工业出版社，2005，141]，但凝胶色谱所用的Sephadex G-10 填料是一种亲水凝胶，其机械强度差，抗压能力弱，检测时需使用低压型(制备)色谱仪， 且该凝胶粒径为40～120μm，导致该方法存在柱效低、分析周期长等缺点。

因此，急需开发研究一种能对头孢类药物的缩合物杂质进行快速检测的分析方法。

(三)发明内容

本发明的目的是开发研究一种能对头孢类药物的缩合物杂质进行快速、准确检测的分 析方法。

本发明的技术方案如下，一种头孢呋辛钠及其缩合物杂质高效液相色谱的快速分析方 法，其特点在于采用一种多孔型聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物为固定相的高聚物色谱柱，高 效液相色谱操作条件为：

a.高聚物色谱柱：MKF-GPC-10，4～10μm，(100～300)×(8.0～4.6)mm(I.D.)；

b.流动相：0.005～0.1mol/L的磷酸盐缓冲液(pH＝6～8)和乙腈的体积比为60～80∶40～20；

c.流速：0.8～1.2mL/min，进样量：10～20μL，柱温：室温；

d.采用UV检测器，检测波长为254±10nm。

与现有技术相比，本发明的优点和效果如下：

1、本发明能将缩合物杂质和头孢呋辛钠先后分开，并能准确测定其缩合物杂质的含量，且 缩合物杂质的出峰位置比较固定，利于解决其定位的问题。

2、整个测试分析全过程仅约0.5h，与现有2005年版中国药典技术(分析周期约为4～5h) 相比，大大缩短了检测时间。

3、本发明能在普通高效液相色谱仪上进行操作，不需专门的低压制备色谱，对检测仪器的 要求较低，方法普及性好。

与药典方法的比较参见表1

表1聚苯乙烯柱与葡聚糖柱(参药典2005)分离缩合物杂质时各个参数的比较

(四)附图说明：

图1为头孢呋辛钠在葡聚糖凝胶柱中的色谱图，其中1、2分别代表缩合物杂质峰和头 孢呋辛钠峰。

图2为收集的头孢呋辛钠缩合物色谱峰的质谱图。

图3为头孢呋辛钠以及自制缩合物杂质在MKF-GPC-10(100mm×7.8mm，5μm)中的HPLC 图，其中流动相：0.01mol/L的磷酸盐缓冲液(pH7.0)-乙腈(70∶30)，流速：1mL/min，线 1、2分别代表头孢呋辛钠样品以及自制缩合物杂质的色谱图。

图4为头孢呋辛钠以及自制缩合物杂质在MKF-GPC-10(100mm×7.8mm，5μm)中的HPLC 图，其中流动相：0.02mol/L的磷酸盐缓冲液(pH7.5)-乙腈(75∶25)，流速：0.8mL/min， 线1、2分别代表头孢呋辛钠样品以及自制缩合物杂质的色谱图。

图5为头孢呋辛钠以及自制缩合物杂质在MKF-GPC-10(100mm×7.8mm，5μm)中的HPLC 图，其中流动相：0.02mol/L的磷酸盐缓冲液(pH7.0)-乙腈(60∶40)，流速：0.8mL/min， 线1、2分别代表头孢呋辛钠样品以及自制缩合物杂质的色谱图。