[发明专利]从人工栽培的红豆杉枝叶中提取紫杉醇的方法

权利要求书

1.一种从人工栽培的红豆杉枝叶中制备紫杉醇的方法，其特征在于依次包括如下步骤：

A、将红豆杉枝叶粉碎后，在40～50℃下用75％～95％甲醇浸泡3次，每次4小时，将滤液浓缩后用体积比为4∶1～1∶1石油醚/水萃取；分出下层水相；

B、用乙酸丙酯萃取下层水相；乙酸丙酯萃取液浓缩，得到紫杉醇含量在2％～5％紫杉醇粗提物；

C、将2％以上紫杉醇粗提物同硅胶混合制备干样，填充了干样到硅胶200～300目的色谱柱上端，分别用4∶1的石油醚-乙酸乙酯、1∶1的石油醚-乙酸乙酯、1∶5的石油醚-乙酸乙酯及乙酸乙酯洗脱，按段将紫杉醇含量在15％～40％之间的洗脱液馏分集中起来，经浓缩、干燥，制得中间产品；

D、将步骤C所得的中间产品用体积比为30∶70的乙腈和含0.1％三氟醋酸水溶解，用高压液相色谱分离，色谱柱为C₁₈硅胶填料，以含三氟醋酸十八烷基吡啶季铵盐的乙腈和含0.1％三氟醋酸水为流动相，收集洗脱液，浓缩，析出紫杉醇晶体和三氟醋酸十八烷基吡啶季铵盐固体的混合物；

此混合物经离心，水洗，再离心，水洗，过滤，冷冻干燥，得到纯度为99.6％以上的紫杉醇。

2.根据权利要求1所述的从人工栽培的红豆杉枝叶中制备紫杉醇的方法，其特征在于：所述的洗脱液和流动相中的溶剂经过精馏后重复使用。

3.根据权利要求1所述的从人工栽培的红豆杉枝叶中制备紫杉醇的方法，其特征在于：步骤A中人工栽培的红豆杉为曼地亚红豆杉、云南红豆杉或东北红豆杉。

4.根据权利要求1所述的从人工栽培的红豆杉枝叶中制备紫杉醇的方法，其特征在于：步骤D中的三氟醋酸十八烷基吡啶季铵盐浓度为2～15mg/mL。

5.根据权利要求1所述的从人工栽培的红豆杉枝叶中制备紫杉醇的方法，其特征在于：步骤D中的流动相乙腈-0.1％三氟醋酸水的体积比为30∶70。

6.根据权利要求1所述的从人工栽培的红豆杉枝叶中制备紫杉醇的方法，其特征在于：步骤D所得到的三氟醋酸十八烷基吡啶季铵盐，经过水洗，离心，过滤，冷冻干燥后重复使用。