[发明专利]检测细菌毒素的糖基功能化分子印迹膜电极的制备方法及应用

权利要求书

1.一种检测细菌毒素的糖基功能化分子印迹膜电极的制备方法，其特征在于包括以下步 骤：

(1)选择能与细菌毒素合成糖基功能化分子印迹聚合物的功能单体；

(2)按一定摩尔比将细菌毒素模板分子、功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶 剂混合均匀制成糖基功能化分子印迹聚合物溶液；

(3)利用电极表面修饰技术，将糖基功能化分子印迹聚合物修饰到传感器电极表面上； 所述细菌毒素模板分子、功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶剂的摩尔比为 0.1～2∶2.5∶0.1～5∶40～80∶0.01～0.10∶1.0～15；

所述功能单体为A-D-吡喃糖基甘露糖、N-乙酰糖胺、N-乙酰乳糖胺、唾液酸神经 节苷脂或神经酰胺三己糖苷。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述引发剂为偶氮二异丁腈；所述致 孔剂为二氯甲烷、氯仿、乙腈、甲醇、异丙醇、四氯化碳、杂环化合物酰胺或砜类；所 述有机溶剂为二氯甲烷或四氯化碳。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述将糖基功能化分子印迹聚合物修 饰到传感器电极表面包括以下步骤：

(1)将工作电极表面用0.05μm的氧化铝粉打磨，超声波清洗，再依次用1mol/L HNO₃， 1mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，晾干；

(2)将晾干的工作电极浸泡于糖基功能化分子印迹聚合物溶液中5-10分钟，再取出用洗 脱剂洗脱20-30分钟，直至将模板分子完全洗掉，然后在室温下干燥5-10分钟；

(3)重复步骤(2)4-7次，制得所述糖基功能化分子印迹膜电极。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于还包括以下步骤：将制得的糖基功能化 分子印迹膜电极浸入pH6.8-7.5的缓冲液中，保存在4℃冰箱12～24h，然后用去离子水 彻底清洗。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述洗脱剂为乙腈、水、甲醇-乙酸 或乙腈-乙酸。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述缓冲液为柠檬酸-磷酸溶液。

7.一种检测细菌毒素的方法，其特征在于包括以下步骤：将按权利要求1～6任意一种方 法制得的糖基功能化分子印迹膜电极连接到电化学工作站，对环境样品提取液中的细菌 毒素进行检测。