[发明专利]一种基于增强型绿色荧光蛋白基因缺失为筛选标记的克隆载体pGreen-S及其构建方法有效
| 申请号: | 200910014352.1 | 申请日: | 2009-02-20 |
| 公开(公告)号: | CN101503699A | 公开(公告)日: | 2009-08-12 |
| 发明(设计)人: | 唐金宝;梁淑娟;陈永 | 申请(专利权)人: | 唐金宝 |
| 主分类号: | C12N15/65 | 分类号: | C12N15/65;C12N15/66;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司: | 济南舜源专利事务所有限公司 | 代理人: | 李 江 |
| 地址: | 261042山东省潍坊*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 基于 增强 绿色 荧光 蛋白 基因 缺失 筛选 标记 克隆 载体 pgreen 及其 构建 | ||
1.一种基于增强型绿色荧光蛋白基因缺失为筛选标记的克隆载体pGreen-S,其特征是:pGreen-S载体主要构件是复制起始序列-EGFP基因上游多克隆位点-EGFP基因序列-EGFP基因下游多克隆位点-lacZ基因序列-抗性选择基因序列;
所述的EGFP基因上游多克隆位点为EcoR I、Sac I、Kpn I、Sma I、Xma I、BamHI及Xba I酶切位点;
所述的EGFP基因下游多克隆位点为Xba I、Sal I、Pst I、SpnI及Hind III酶切位点;
载体pGreen-S的EGFP活性表达无需IPTG的诱导;
在EGFP基因上游多克隆位点、下游多克隆位点各选择一个合适酶切位点,实现EGFP基因的缺失而筛选基因重组子。
2.如权利要求1所述的基于增强型绿色荧光蛋白基因缺失为筛选标记的克隆载体pGreen-S,其特征是:所述的抗性选择基因序列为Ampr基因序列。
3.一种宿主细胞,其特征是:含有权利要求1或2所述的克隆载体。
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