[发明专利]用于快速检测金黄色葡萄球菌的试剂及其方法

权利要求书

1.用于快速检测金黄色葡萄球菌的试剂，其特征在于：所述试剂包括：

1)PEN培养基

所述PEN培养基由PEN基础培养基和PEN增补剂组成；

所述PEN基础培养基由以下组分组成：牛肉浸粉1～5g/L、胰蛋白胨5～10g/L、大豆蛋白胨5～10g/L、丙酮酸钠3～7g/L、氯化钠3～10g/L、琼脂15g/L；

所述PEN增补剂由以下组分组成：多黏菌素B 15～30mg、奈啶酮酸5～15mg、50wt％卵黄-生理盐水溶液10～20mL，冻干血浆25～40g，无菌去离子水25～40mL；

2)TCF显色片

所述TCF显色片是将直径略小于培养皿的无菌滤纸片置于煮沸稍冷却后的TCF显色液中，均匀染色后在无菌条件下晾干而得；所述TCF显色液由以下组分组成：0.115％氯化钙溶液15～30mL、TrisBase 2～8g、NaCl 0.5～15g、甲苯氨蓝0.5～5g、DNA 1～6g、95％乙醇200～400mL、去离子水400～600mL。

2.一种用于食品、药品和卫生用品中的快速检测金黄色葡萄球菌的方法，其特征在于：使用权利要求1所述的试剂，包括以下步骤：

A.制备PEN培养基平板

每1000mL去离子水中加入PEN基础培养基，混匀灭菌后冷却至45～50℃时，加入PEN增补剂混匀，倒平板，备用；

B.准备检样液

取待检样品和无菌生理盐水摇匀，制备到含待检样品体积百分比8-12％的检样液，

或制备到含待检样品质量百分比8-12％的检样液；

C.接种培养

将0.05～0.2mL检样液涂布到步骤A所述的培养基平板上，35±2℃培养18～22h；

D.热处理

将步骤C培养后培养基上出现菌落的平板置于62±2℃培养箱1～1.5h；

E.TCF显色片显色

打开培养基平板盖子，把TCF显色片贴于培养基表面，避免气泡产生，盖上盖子，35±2℃培养10～15min后揭下TCF显色片置于另一洁净的培养基平板内，35±2℃再培养30～60min后观察显色片的颜色变化，若出现粉红色的晕圈即表明待检样品中存在金黄色葡萄球菌。

3.根据权利要求2所述的快速检测金黄色葡萄球菌的方法，其特征在于：所述步骤C接种培养前包括增菌步骤：将检样液接种于含7.5wt％NaCl的肉汤中，37℃培养6～24h后得到增菌液。

4.根据权利要求3所述的快速检测金黄色葡萄球菌的方法，其特征在于：所述步骤C为将0.05mL增菌液涂布到步骤A所述的培养基平板上，35±2℃培养18～22h。