[发明专利]驴胶补血制剂及其原料、中间体的指纹图谱测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药指纹图谱的测定方法，更具体地说，是涉及用高效液 相色谱(HPLC)指纹图谱方法来测定驴胶补血制剂及其原料、中间体的化学 成分的方法。

背景技术

全球约有30亿人患有不同程度的贫血，每年因患贫血引致各类疾病 而死亡的人数上千万。近年来，随着现代生活的发展，环境大气污染，化 学合成品的增多等因素使上述病症的发生有明显增长趋势。据流行病学调 查表明，仅在1529名育龄妇女中，贫血患病率为31.2％，而在经济水平 中下的县(市)农村儿童贫血发生率高达39.1％。此外，苯、有机磷农药 长期接触以及药源性所致贫血、白细胞、血小板减少可见于多种职业中。 驴胶补血制剂(如冲剂)是由阿胶、黄芪、党参、熟地黄、白术、当归经提 取加工制成，具有滋阴补血，健脾益气，调经活血之功效，用于久病体虚， 气虚血亏型月经不调。临床广泛应用于贫血症、白细胞减少症、血小板减 少症和月经病等的治疗，疗效确切(余三红.驴胶补血冲剂的临床应用概述. 湖南中医杂志.1999，(1)：40)。其中，驴胶补血颗粒制剂的配方和质量控 制方法已经收入在中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第十一 册(WS3-B-2159-96)和中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第十 六册(WS3-B-3062-98)。由于其质量控制方法不够全面，难以全面表征它 们的物理化学特征，因此，对驴胶补血颗粒制剂的提取精制方法、质量控 制方法进行改进成为人们积极研究的课题。

中药指纹图谱是指某种中药材或中成药中所共有的、具有特征性的某 类或数类成分的色谱或光谱的图谱。在现阶段中药的有效成分绝大多数没 有明确的情况下，中药指纹图谱对于有效控制中药材或中成药的质量具有 重要的意义。日本汉方药主要生产企业在20世纪80年代就已经在企业内 部采用高效液相指纹图谱控制质量。德国、法国在对银杏叶提取物联合开 发的过程中，发现银杏叶提取物的医疗作用是提取物所得物质群的整体作 用结果，而对这样一个整体的质量控制，亦采用高效液相指纹图谱方法。 美国FDA最近几年制定的植物草药指南中已经明确把指纹图谱作为混合 物质群的质量控制方法(FDA.Guidance of Industry：Botanical Drug(Draft). 2000 August)。

随着研究的深入，人们发现，作为中医理论的实践产物，中药，尤其 是复方中药，其中所含的任一成分都不能代表其整体疗效。现行的参照西 药(合成药)质量控制模式的质量标准不能恰当地反映中药内在的质量，现 行的质量控制模式向一种综合的、宏观的、可量化的鉴别与主要有效成分 含量测定结合已是发展的趋势。中药质量评价的现行标准是利用光谱或色 谱手段鉴别和测定某一种或几种有效成分、活性成分或指标成分，以及药 典规定的常规检查项目。然而，中医用药的特点是复方配伍，任何单一的 有效或活性成分的含量高低均不能表达其整体的疗效。例如，黄芪所含的 黄芪甲苷(Astragaloside IV)是当前被选择为质量标准的鉴别和含量测定的 最为常见的指标，但并没有依据证明黄芪甲苷与黄芪的功能主治的明确联 系。同样，黄连、黄柏、三棵针均含小檗碱，一般都以它作为检测的目标， 但是三者的功能主治却截然不同。复方制剂的情况就更加复杂。中医这种 不是一对一的非线性的理论和实践说明中药质量应该采用某种宏观的综 合的质量评价手段。

驴胶补血制剂是由阿胶、黄芪为主要原料制成的制剂，临床上用于治 疗贫血症、白细胞减少症、血小板减少症和月经病等各类疾病，其治疗效 果已经得到临床的验证，而是否能够保证药物的质量以及驴胶补血制剂中 有效成分的含量，是决定驴胶补血制剂疗效的基础。在产品质量控制方面， 以前主要控制指标是性状、理化试验、含氮量、水分等，后面增加了薄层 鉴别、含量测定等定性或定量指标，但作为一个中药复方制剂，如果用一、 二种黄芪的活性成分来说明驴胶补血制剂的内在质量，具有一定的片面 性，更不用说无药效的指标成分了。要控制驴胶补血制剂的功效，只针对 其一、二个化学成分进行表征和控制是不够的，必须对它的物质群整体予 以控制。所以，除了“微观分析”外，还应该用某种“宏观分析”方法，从整 体上有效地表征中药质量。指纹图谱作为中草药及其提取物质量控制方 法，目前已经成为国际共识。现在，对黄芪中活性成分如黄芪甲苷等的测 定方法较多，但如何能够从更宏观的角度对驴胶补血制剂中化学组分的宏 观指纹图谱的建立方法却未见报道。