[发明专利]驴胶补血制剂及其原料、中间体的指纹图谱测定方法

权利要求书

1.一种驴胶补血制剂指纹图谱的测定方法，其特征在于，该方 法包括以下步骤：

(a)供试品溶液的制备：定量称取驴胶补血制剂，用水、甲醇或 乙醇中的至少一种溶剂提取，定容，得供试品溶液；

(b)供试品溶液的测定：吸取供试品溶液注入液相色谱仪，以高 效液相色谱法采用梯度洗脱进行测定，得到驴胶补血制剂的指纹图 谱；

其中，高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱的填料为十八烷基硅 烷键合硅胶；流动相A为乙腈和甲醇的混合溶液，流动相B为水， 流动相中流动相A与流动相B的体积比随时间逐渐增加；流动相A 中乙腈和甲醇的体积比为10∶1～1∶10；PDA检测器检测波长为260～ 275nm；色谱柱的柱温为20～28℃；梯度洗脱的程序如下，其中下述 比例均为体积比：

0～30分钟时，流速为0.50～1.00毫升/分钟，流动相A∶流动相 B＝0∶100～2∶98；

31～50分钟时，流速为1.00～0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相 B＝2∶98～20∶80；

51～90分钟时，流速为0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相 B＝20∶80～0∶100。

2.一种驴胶补血制剂的原料药材的指纹图谱的测定方法，其特 征在于，该方法包括以下步骤：

(a)原料药材供试品溶液的制备：定量称取原料药材，用水、甲 醇或乙醇中的至少一种溶剂提取，定容，得供试品溶液；

(b)供试品溶液的测定：吸取供试品溶液注入液相色谱仪，以高 效液相色谱法采用梯度洗脱进行测定，得到原料药材化学成分的指纹 图谱；

其中，高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱的填料为十八烷基硅 烷键合硅胶；流动相A为乙腈和甲醇的混合溶液，流动相B为水， 流动相中流动相A与流动相B的体积比随时间逐渐增加；流动相A 中乙腈和甲醇的体积比为10∶1～1∶10；PDA检测器检测波长为260～ 275nm；色谱柱的柱温为20～28℃；梯度洗脱的程序如下，其中下述 比例均为体积比：

0～30分钟时，流速为0.50～1.00毫升/分钟，流动相A∶流动相 B＝0∶100～2∶98；

31～50分钟时，流速为1.00～0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相 B＝2∶98～20∶80；

51～90分钟时，流速为0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相 B＝20∶80～0∶100。

3.一种驴胶补血制剂的中间体的指纹图谱的测定方法，其特征 在于，该方法包括以下步骤：

(a)驴胶补血制剂的中间体供试品溶液的制备：定量称取驴胶补 血制剂的中间体，用水、甲醇或乙醇中的至少一种溶剂提取，定容， 得供试品溶液；

(b)供试品溶液的测定：吸取供试品溶液注入液相色谱仪，以高 效液相色谱法采用梯度洗脱进行测定，得到驴胶补血制剂的中间体化 学成分的指纹图谱；

其中，高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱的填料为十八烷基硅 烷键合硅胶；流动相A为乙腈和甲醇的混合溶液，流动相B为水， 流动相中流动相A与流动相B的体积比随时间逐渐增加；流动相A 中乙腈和甲醇的体积比为10∶1～1∶10；PDA检测器检测波长为260～ 275nm；色谱柱的柱温为20～28℃；梯度洗脱的程序如下，其中下述 比例均为体积比：

0～30分钟时，流速为0.50～1.00毫升/分钟，流动相A∶流动相 B＝0∶100～2∶98；

31～50分钟时，流速为1.00～0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相 B＝2∶98～20∶80；

51～90分钟时，流速为0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相 B＝20∶80～0∶100。

4.根据权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于，所述 高效液相色谱的检测波长为270nm。

5.根据权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于，所述 色谱柱的柱温为25℃。

6.根据权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于，所述 流动相A中乙腈和甲醇的体积比为9∶1。

7.根据权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于，所述 梯度洗脱的程序如下，其中下述比例均为体积比：

0分钟时，流速为0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相B＝0∶100；

30分钟时，流速为1.00毫升/分钟，流动相A∶流动相B＝2∶98；

50分钟时，流速为0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相B＝20∶80；

65分钟时，流速为0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相B＝45∶55；

80分钟时，流速为0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相B＝55∶45；

90分钟时，流速为0.50毫升/分钟，流动相A∶流动相B＝0∶100。