[发明专利]通过原生质体融合得到的乙醇抗性酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)GP-01，其生产方法，通过利用酿酒酵母GP-01和作为锗来源的高水溶性偏锗酸钠生产包含高含量生物有机锗的酵母的方法

说明书

技术领域

本发明涉及具有乙醇抗性并包含高含量有机生物锗的酵母和用于生产该酵母的方法。更具体地说，该方法包括：通过酿酒酵母(Saccharomy ces cervisiae)(KCTC7904)和乙醇假丝酵母(Candida ethanolica)(KCTC7181)的原生质体融合生产突变的酿酒酵母(S.cervisiae)，即酵母GP-01，所述的酵母GP-01对高浓度乙醇具有抗性；将酵母GP-01与偏锗酸钠(Na₂GeO₃)进行培养，以便通过生物转化将锗接种到酵母GP-01中；和最终获得具有乙醇抗性并包含高含量有机生物锗的突变的酵母(以下称酵母Ge-32K)。

背景技术

锗分类为有机锗和无机锗(GeO₂)。已知在人类器官内累积较长时间的无机锗导致强的毒性。

有机锗天然地包含在微生物、矿物质水和医用草药中。而且，可以通过在真菌体内生物合成或者化学合成生产有机锗。有机锗与细胞中的蛋白质、肽等结合，并且通过许多论文和科学期刊(Kor.J.Microbiol.Biotechnol.，2007.35(2)：118-127；J.Kor.Soc.Food Sci.Nutr.2006.35(6)：683-689；J.Kor.Soc.Appl.Biol.Chem.2005.48(3)：246-251；Immune Network.2006.6(2)：86-92)建立了有机锗用于增强免疫力、抑制肿瘤细胞的产生和扩散(转移)、治疗和预防各种慢性疾病等的疗效。此外，众所周知有机锗具有以下功能：通过向细胞提供氧的抗癌活性(J.Orthomol.Medicin.，1986.1：145-148)；纯化血液(Medicin.Hy-phothesis.，1988.26：207-215)；通过活化NK细胞和巨噬细胞增强免疫力(Microbiol.Immunol.，1985.29：65-74；Kor.J.Microbiol.Biotechnol.，2007.35(2)：118-127)；诱导干扰素生成(Gantokagakutyoho，9：1976-1980)、抑制癌细胞产生和扩散(Cancer and Chemotheraphy.1985.12(12)：2345-2351)；抑制关节炎(Autonomic&Autacoid Pharmacol.2005.25：129-134)；预防和治疗各种疾病，例如神经痛(Biotechnol.Appl.Biochem.，1986.8：379-386)、骨质疏松症(Germanium；The health and life enhancer.1988)；降低高的血压(高血压)和高脂血症胆固醇(Pharmacol.，1990.41：286-291)；缓解肝毒素(J.Kor.Soc.Food.Nutr.，1994.23(4)：581-586)等。由于所述的众所周知的疗效，在美国、日本、欧洲和韩国，在几十年中，对有机锗已经广泛地进行了许多研究，所述的研究试图将其用于治疗各种顽固性疾病，例如癌症和心脏病等(Anticancer Res.，1985.5(5)：479-483)。

可以通过从药用草药，例如人参(ginseng)、灵芝(ganoderma)中提取得到有机锗，但由于其高成本和低生产率此种方法很难商业化。此外，可以通过利用有机酸化学合成二氧化锗(GeO₂)获得有机锗，但从化学合成中得到的产品中包含无机锗，因此由于未确认的安全性，在食物或药物供给中的用途受到限制(US FDA的进口警戒，1988)。

事实上，酵母在烘焙业、糖果业和酿酒业中大量地使用了数千年。而且，酵母自身作为人类食物的来源是有用的，并且作为下一代蛋白质的来源作为单细胞蛋白(SCP)是有吸引力的，，所述的单细胞蛋白理想地由蛋白质、维生素、矿物质等组成，其特征在于高蛋白和低脂肪。

此外，在单细胞中，酵母是维生素B的最好来源，并包含许多酶类等，这些酶主要服务于体内的代谢。在这方面，酵母用作保健产品。最近，对保健产品进行了大量的研究和开发，从而通过得到的酵母实现生理和药用效果。为了实现所述目的，非常需要开发包含高含量有机生物锗的酵母。

在传统方法中，通过在包含无机锗(GeO₂)的培养基中培养酵母来生产包含有机生物锗的酵母。由于酵母在包含高含量无机锗的培养基条件下生长受到限制这一缺点，因此在传统方法中难以有成本效益并且大规模地生产包含适量有机生物锗的酵母。