[发明专利]用于皮肤伤口无疤痕愈合的多靶标RNAi治疗

权利要求书

1.一种小干扰RNA(siRNA)分子，其包含双链(双链体)寡聚核苷酸，其中所述寡聚核苷酸靶向单链(ss)靶RNA分子中的互补核苷酸序列，其中所述ss靶RNA分子是编码至少多肽或蛋白的一部分的mRNA，所述多肽或蛋白的活性促进炎症、伤口愈合或皮肤组织的疤痕形成，或其中所述ss靶RNA分子是用作调控分子的microRNA(miRNA)，所述调控分子的活性促进炎症、伤口愈合或皮肤组织的疤痕形成。

2.权利要求1的siRNA分子，其中所述靶mRNA分子编码选自促炎通路基因、促血管生成通路基因和促细胞增殖通路基因的基因。

3.权利要求2的siRNA分子，其中所述基因是Hoxb13、TGF-β1、TGF-β2或Cox-2。

4.一种组合物，其包含权利要求1、2或3的siRNA分子和药学上可接受的载体。

5.一种组合物，其包含至少三种siRNA分子和药学上可接受的载体，其中每种s iRNA分子与编码基因的mRNA分子结合，所述基因选自由促炎通路基因、促血管生成通路基因和促细胞增殖通路基因组成的组。

6.权利要求5的组合物，其中所述至少三种siRNA分子的每一种与编码选自所述组的不同基因的不同mRNA分子结合。

7.权利要求6的组合物，其中所述基因的每一种选自不同的所述通路基因的组。

8.权利要求5的组合物，其中所述siRNA分子选自表A-H中鉴定的混合物。

9.权利要求5的组合物，其中所述siRNA分子靶向一种或多种表2、3、4或5中所列的序列，所述序列抑制人和小鼠细胞中的Hoxb13、TGF-β1、TGF-β2或Cox-2的表达。

10.权利要求5的组合物，其中所述siRNA分子选自表6、7、8或9中所列的抑制人和小鼠细胞中的PDGFa、FGF-2、VEGF A或核纤层蛋白B1的表达的siRNA分子。

11.权利要求4-10中的任一项的组合物，其中所述药学上可接受的载体包括分支的组氨酸多肽或分支的赖氨酸多肽。

12.用于治疗受试者中的真皮或表皮伤口的方法，其中所述伤口的特征至少部分在于炎症和新血管形成，所述方法包括给所述受试者施用药学有效量的权利要求1-3的任一项的siRNA。

13.用于治疗受试者中的真皮或表皮伤口的方法，其中所述伤口的特征至少部分在于炎症和新血管形成，所述方法包括给所述受试者施用包含至少一种siRNA分子以及药学上可接受的载体的组合物，其中所述至少一种siRNA分子抑制至少一种基因的表达，所述基因促进所述伤口的愈合中的病理学或不希望的过程。

14.权利要求13的方法，其中所述至少一种基因选自促炎通路基因、促血管生成通路基因和促细胞增殖通路基因。

15.用于治疗受试者中的真皮或表皮伤口的方法，其中所述伤口的特征至少部分在于炎症和新血管形成，所述方法包括给所述受试者施用药学有效量的权利要求4-11的任一项的组合物。

16.权利要求12、13、14或15的方法，其中所述受试者是哺乳动物。

17.权利要求12、13、14或15的方法，其中所述受试者是人。

18.鉴定包含双链(双链体)寡聚核苷酸的siRNA分子的方法，其中所述寡聚核苷酸靶向单链(ss)靶RNA分子中的互补核苷酸序列，其中所述ss靶RNA分子是编码至少多肽或蛋白的一部分的mRNA，所述多肽或蛋白的活性促进炎症、伤口愈合或皮肤组织的疤痕形成，或其中所述ss靶RNA分子是用作调控分子的microRNA(miRNA)，所述调控分子的活性促进炎症、伤口愈合或皮肤组织的疤痕形成，所述方法包括步骤：

(a)产生经设计靶向所述ss靶RNA分子中的互补核苷酸序列的siRNA双链体的集合，其中所述siRNA双链体的靶向性链包含不同的核苷酸序列；

(b)选择在体外对所述靶分子展示最高的期望的作用的s iRNA双链体；

(c)在动物伤口模型中评估所选择的siRNA双链体；和

(d)选择在所述模型中展示最大的功效的siRNA双链体。