[发明专利]新型葡萄糖脱氢酶

权利要求书

1.一种葡萄糖脱氢酶，其具有基于其与葡萄糖的反应性，小于3％的针对麦芽糖、半乳糖和木糖的反应性，并且具有80℃以上的温度稳定性。

2.根据权利要求1所述葡萄糖脱氢酶，其在葡萄糖氧化反应中利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)作为辅酶。

3.来源于超嗜热古细菌的葡萄糖脱氢酶，所述葡萄糖脱氢酶具有下述特性(A)-(F)：

(A)温度稳定性：90℃以下；

(B)pH稳定性：4.8-9.7；

(C)最适反应温度：85℃；

(D)最适pH：9.7；

(E)辅酶：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)；

(F)底物特异性：当使用NADP作为辅酶时，所述葡萄糖脱氢酶基于其对葡萄糖的活性，表现出2％以上且小于3％的针对木糖和麦芽糖的活性，和基于其对葡萄糖的活性，表现出1％以上且小于2％的针对半乳糖和甘露糖的活性，所述葡萄糖脱氢酶基本上不与乳糖、山梨糖醇、和蔗糖反应；并且

当使用NAD作为辅酶时，所述葡萄糖脱氢酶基本上不与木糖、麦芽糖、半乳糖、甘露糖、乳糖、山梨糖醇、和蔗糖反应。

4.具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的葡萄糖脱氢酶。

5.包括由SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列缺失、取代、插入、或添加一个或多个氨基酸所形成的氨基酸序列的葡萄糖脱氢酶，所述葡萄糖脱氢酶具有的活性基本上等于具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的葡萄糖脱氢酶的活性。

6.编码权利要求1-5中任一项所述的葡萄糖脱氢酶的DNA。

7.包括权利要求6所述的DNA的表达载体，所述DNA被功能性偶联到在引入所述DNA的宿主细胞中可操作的启动子上。

8.使用权利要求7所述的表达载体转化的转化微生物。

9.根据权利要求8所述的转化的微生物，其中所述微生物是大肠杆菌(Escherichia coli)。

10.用于生产权利要求1-5中任一项所述的葡萄糖脱氢酶的方法，其包括培养权利要求8或9所述的微生物，并且从所得到的培养物收集葡萄糖脱氢酶。

11.用于定量葡萄糖的组合物，其包含权利要求1-5中任一项所述的葡萄糖脱氢酶。

12.用于定量葡萄糖的方法，其包括使用权利要求1-5中任一项所述的葡萄糖脱氢酶来定量葡萄糖。