[发明专利]微生物的快速检测

权利要求书

1.一种检测样品中的靶标微生物的方法，所述方法包括：

a)在容器中匀化样品，其中所述容器包含生长培养基；

b)温育所述容器中的所述经匀化的样品以在靶标微生物存在于所述样品中时对其进行富集；以及

c)检测所述靶标微生物的不经扩增的核酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶标微生物选自肠杆菌科(Enterobacteriaceae)和微球菌科(Micrococcaceae)。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶标微生物选自葡萄球菌属(Staphylococcus spp.)、链球菌属(Sreptococcus spp.)、假单胞菌属(Pseudomonas spp.)、肠球菌属(Enterococcus spp.)、沙门氏菌属(Salmonella spp.)、军团菌属(Legionella spp.)、志贺氏菌属(Shigella spp.)、耶尔森氏菌属(Yersinia spp.)、肠杆菌属(Enterobacter spp.)、埃希氏菌属(Escherichia spp.)、芽孢杆菌属(Bacillus spp.)、李斯特氏菌属(Listeriaspp.)、弯曲杆菌属(Campylobacter spp.)、弧菌属(Vibrio spp.)、梭菌属(Clostridium spp.)和棒状杆菌属(Corynebacteria spp.)。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述检测步骤包括i)裂解所述样品中的微生物；ii)使核酸探针与所述靶标微生物的靶标核酸序列杂交以形成探针：靶标复合物，其中所述探针包含被所述复合物稳定的标记；iii)选择性降解未杂交的探针中存在的所述标记；以及iv)检测被稳定化的标记的存在或量，作为所述样品中所述靶标核酸序列的存在或量的度量。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述探针用吖啶鎓酯进行标记。

6.根据权利要求4所述的方法，其中所述探针与所述靶标微生物的核糖体RNA杂交。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述生长培养基包含针对非靶标微生物的生长抑制剂。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述生长抑制剂选自胆汁盐、脱氧胆酸钠、亚硒酸钠、硫代硫酸钠、氯化锂、亚碲酸钾、连四硫酸钠、乙酰磺胺钠、扁桃酸、亚硒酸半胱氨酸连四硫酸盐、磺胺二甲嘧啶、亮绿、孔雀石绿、结晶紫、Tergitol 4、磺胺嘧啶、阿米卡星、氨曲南、萘啶酮酸、吖啶黄、多粘菌素B、新生霉素和阿拉磷。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述温育步骤是在30℃至45℃下进行10至18小时。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述温育步骤是在35℃至42℃下进行10至18小时。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述生长培养基包含能让靶标微生物生长至最低水平10⁴cfu/mL的营养物。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述生长培养基包含支持超过一种靶标微生物的生长的营养物。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述样品是食物样品。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述食物样品是乳制品、肉、蔬菜或海产食品。

15.根据权利要求1所述的方法，其中所述容器是袋。

16.一种用于检测微生物的制品，所述制品包括多孔固体基材，其中所述固体基材的每个孔包被有裂解试剂和核酸探针。

17.根据权利要求16所述的制品，其还包括匀化容器，所述匀化容器包含涂覆在所述容器内表面上的生长培养基。

18.根据权利要求17所述的制品，其中所述涂覆层为干燥的涂覆层。

19.根据权利要求17所述的制品，其中所述匀化容器还包含包被在所述容器内表面上的针对非靶标微生物的生长抑制剂。

20.根据权利要求16所述的制品，其中所述制品包括多个多孔基材，其中每个多孔基材专用于不同的微生物。