[发明专利]用因子Bb特异性抗体抑制补体活化的方法

说明书

相关申请

本申请要求2007年8月27日提交的美国临时专利申请号60/968,146的优先权，其主题内容通过引用纳入本文。

发明领域

本发明涉及补体活化。具体说，本发明涉及抑制补体经旁路活化的方法。

发明背景

补体系统负责引发和放大对微生物感染和其它急性损伤的炎症应答反应。补体活化不适当意味可能致病。例如，补体系统可促成一些急性和慢性疾病的发病，包括动脉粥样硬化、急性心肌梗塞缺血后重灌输、过敏性紫癜肾炎、免疫复合物血管炎、类风湿关节炎、动脉炎、动脉瘤、中风、心肌病、出血性休克、挤压伤、多器官衰竭症、低血容量休克和肠缺血、移植排斥、心脏手术、PTCA(经皮冠状动脉成型术)、自发性流产、神经元损伤、脊髓损伤、重症肌无力、亨廷顿病、肌萎缩侧索硬化症、多发性硬化症、急性感染性多神经炎、帕金森病、阿尔茨海默病、急性呼吸窘迫综合征、哮喘、慢性阻塞性肺病、输液相关急性肺损伤、急性肺损伤、古德帕斯彻病、心肌梗塞、心肺分流术后炎症、心肺分流术、败血性休克、移植物排斥、活体外移植、烧伤、全身性红斑狼疮、膜性肾炎、贝惹病(berger’s disease)、牛皮癣、类天疱疮、皮肌炎、抗磷脂综合征、炎性肠病、血液透析、白细胞清除术、血浆置换术、肝素诱导的体外膜式人工氧合LDL沉淀术、体外膜式人工氧合术和黄斑变性。

激活补体可通过三条不同的酶促级联反应活化，称为“经典通路”、“凝集素/MBL”通路和“旁路”(分别为CP，MBL和AP)。图1显示了这三条通路图。AP负责补体总活性的80-95％。经典和旁路能产生C3a和C5a。然而，这些过敏毒素产生的水平根据激活的通路而有所不同。凝集素通路是经典通路的变化形式。许多疾病征候中旁路被激活。在AP的引发和扩大中有三种蛋白因子B、D和P起着主要作用。称为MAC的终末复合物负责裂解细胞。C3a和C5a均是强效过敏毒素，负责激活血小板、中性粒细胞和单核细胞及释放炎性分子，例如弹性蛋白酶、TNF、IL-1、VEGF和过氧化物酶。

因子B由二个分开的结构域Ba(分子量33kDa)和Bb(分子量60kDa)组成。Ba结构域包含三个短的重复共有序列，称为SCR1、SCR2和SCR3(图3)。采用突变分析和特异性Ba单克隆抗体显示因子B的功能结构域位于SCR3区中。用SCR区产生的抗体在几种疾病的动物模型中证明有临床效益。因子B的Bb结构域除了含丝氨酸蛋白酶功能域外还含沃威洛布兰德(VonWillowbrand，VWF)结构域。各种研究显示Ba结构域对因子B的功能至关重要，抑制补体被活化需要抑制因子B与C3b结合。

一种小而重要的分子备解素能结合C3b形成P-C3b复合物。因子B可结合游离的C3b和P-C3形成C3bB与PC3bB的复合物。因子D可切割这些复合物形成C3bBb和PC3bBb，这二者具有C3-转化酶活性。产生的转化酶能切割C3产生C3b和C3a。新产生的C3b片段共价结合靶分子然后与因子B和D相互作用形成补体旁路更多的C3转化酶分子。

参见图2，此图说明了AP的活化，已知与C-3b结合的备解素能稳定旁路的C3-转化酶。由于旁路C3-转化酶的底物是C3，因此C3既是该反应的组分也是其产物。

随着C3转化酶产生越来越多量的C3b，放大环路得以建立。此外，经典通路也产生能结合因子B的C3b，从而衔接补体旁路，即使触发是由CP介导的。所有这三条经典、凝集素和旁路均会聚于C3，而C3被C3转化酶切割形成C3b和C3a。C3a是一种强效过敏毒素，意味可能导致各种临床疾病。C3a能激活中性粒细胞、单核细胞、血小板、肥大细胞和T细胞。在佐剂诱导的关节炎模型中已证明C3a对诱导脚爪浮肿至关重要。

新形成的C3b加入已产生的C3转化酶可形成C5转化酶，后者可切割C5产生C5b和C5a。C5a与C3a相似也是强效过敏毒素，能引起平滑肌、血管紧张度和血管渗透性的改变。它还是中性粒细胞、单核细胞、血小板、内皮细胞和T细胞的强效趋化因子和激活剂。C5a-介导的细胞激活通过诱导释放其它炎症介质，包括细胞因子、水解酶、花生四烯酸代谢产物和活性氧可显著放大炎症应答反应。