[发明专利]炎性肠病的诊断、分期和监测

说明书

发明领域

本发明涉及炎性肠病的诊断、分期和监测。

发明背景

炎性肠病(IBD)包括克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)，二者均导致肠道长期损伤。最近将微观结肠炎、胶原性结肠炎和淋巴细胞性结肠炎也包括在IBD中。外部抗原、免疫反应受损和遗传因素的组合看来是IBD致病因素，但引起肠道炎症的机制尚不清楚(1)。迄今为止，业已提出了许多潜在的抗原，例如源自肠道CMV感染(2)和持久麻疹病毒感染(3)的抗原。

引流肠道内含物的肠系膜淋巴结最有可能是IBD中引发和维持炎症的关键病灶。触发炎症的抗原从肠壁主动输送到淋巴结从而呈递到免疫系统(1，4)。现已开发了技术鉴定引流肠道病理学区域的第一淋巴结并在手术期间收集这些淋巴结(5)。本发明公开的构建试验能根据细胞表面标记表达和mRNA表达阵列状况测定来描述不同的IBD诊断和分期。这些模式与肠道炎症的类型和活动有关，因此可用于对疾病活动(包括对治疗的反应)进行诊断、分期和监测。

在瑞典，每年诊断到1400例新IBD病人。新诊断的病人数量最近数年有所增加。IBD发病率峰值出现在20岁(6，7)。肠道是复杂的微环境，免疫活性细胞在其间遭遇各种内源性和外源性因子。这些相互作用产生了由固有层中T细胞丰度反映的持续、低级炎症(8)。T细胞不停准备抵御有害病原体，但它们忽视无害的饮食抗原或正常寄居细菌群落的成员。当肠道免疫系统中耐受性和反应之间的平衡被打破时，即可导致IBD。

CD和UC是IBD的两种主要形式。在CD中，肠的任何部分可受影响，但最常见的是影响回肠盲肠区域(50％)和结肠(30％)。约三分之一的患者还伴有肛周疾病。小肠的几个短区段可能受影响，常称为跳跃病损。在组织病理学上，炎症是透壁的；在最多约60％的患者中观察到淋巴细胞和巨噬细胞的密集浸润以及肉芽肿。UC通常涉及直肠，并向近端延伸，所述延伸在各患者之间有所不同；然而，该疾病常局限于结肠。当炎症还涉及结肠右曲(right colonic flexure)时，利用术语“总结肠”。在微观上，粘膜炎症是浅表的，并富含淋巴细胞和粒细胞。溃疡和隐窝脓肿是常见的(1)。除了长期炎症的症状，例如腹泻(常含血)、营养不良、发热和疼痛外，患者还长期具有产生上皮异常增殖和最终发展成肠道癌症的风险(9)。约15％的IBD患者的结肠炎不确定，因此，不能作出CD或UC的确切诊断。更重要的是，对患有爆发性结肠炎(fulminant colitis)的患者的诊断常不确定。当要决定是否立即医学治疗和需要长期前瞻，决定最佳外科手术治疗时，正确的诊断至关重要。CD中的外科手术治疗包括切除发炎区段，通过结构成形术(stricturoplasties)治疗狭窄，受影响区段的结肠切除或者严重结肠炎情况中的全结肠切除术和回肠造口术。CD的重建外科手术常是回肠直肠吻合术以恢复肠道连续性。较少选择骨盆袋(pelvic pouch)，因为在回肠直肠吻合术区域中瘘管形成相关的并发症风险高。一些患者最终要进行永久性回肠造口术。常通过结肠切除术和回肠造口术作为急诊手术来治疗UC导致严重结肠炎的患者。6个月后，可选择回肠直肠吻合术或骨盆袋作为确定的外科手术治疗，但在一些病例中，永久性回肠造口术可能是唯一的可行方案。

几种证据暗示CD是正常肠道菌群耐受性破坏所致。在人中，业已证明患者固有层中单核的细胞对自体粪便提取物起反应，而在正常对照中不是这样(10)。在CD患者淋巴细胞对自体肠道细菌超声波处理物的体外增殖的观察中明显看出T细胞刺激对抗原的依赖性，其中抗-MHCII类抗体抑制了所述增殖(11)。对于UC，微环境的作用不大清楚，考虑到对免疫球蛋白(IgG)的依赖性、与自身免疫疾病，例如硬化性胆管炎的相关性、自身抗体的频率和结肠粘膜特异性，炎症看来是基于自身免疫-样发病机理(12)。据假设，针对肠的免疫反应可能是调节性T细胞的抑制作用不足所致(1，4，10)。

活性UC的特征在于活化粒细胞和单核细胞/巨噬细胞浸润入结肠粘膜。这些浸润性细胞是促炎细胞因子的主要来源。IBD患者可能对医学治疗产生耐受性。原因可能是粒细胞、细胞因子的分布或免疫细胞的功能特征，包括类固醇受体表达的改变。

目前，IBD的诊断和分期是基于临床参数(白蛋白、SR、CRP、发热、排便量)的组合以及内窥镜检查标准和组织病理学变化。通过显微术评估炎症活性，但只考虑活检中存在的细胞的总体类型和数量。活动特征未作测定。

发明目的

本发明的目的是提供能区分活动性和非活动性炎性肠病(IBD)的方法。