[发明专利]炎性肠病的诊断、分期和监测

权利要求书

1.一种区分患者中活动性和非活动性IBD的方法，所述方法包括提供怀疑患病的胃肠粘膜，特别是远端回肠或结肠粘膜或引流所述胃肠粘膜的警戒淋巴结的活检样品；制备该样品的单细胞悬液；利用直接标记的荧光CD69抗体分析该单细胞悬液中CD4+T辅助细胞上炎症活化标记CD69的表达情况；比较如此测定的表达CD 69的T辅助细胞数量与从健康人的肠组织获得的相应单细胞悬液中测定的表达CD69的T辅助细胞数量；其中表达CD69的T辅助细胞水平显著增加表示存在活动性IBD，而T辅助细胞水平增加不显著表示存在非活动性IBD。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，通过流式细胞术进行分析。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述抗体是直接标记的抗体。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述抗体是荧光抗体。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述水平显著增加的特征在于p＜0.009。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述水平增加不显著的特征在于0.03＜p＞0.009。

7.一种区分IBD患者中溃疡性结肠炎和克罗恩病的方法，所述方法包括提供从患病肠粘膜或引流这种粘膜的警戒淋巴结获得的患者活检样品，制备该样品的单细胞悬液；测定该悬液或其上清液中由活化的1型T辅助细胞(Th1)驱动的，在免疫活化中产生的表示克罗恩病的一种或多种细胞因子，和由活化的2型T辅助细胞(Th2)驱动的，在免疫活化中产生的表示溃疡性结肠炎的一种或多种细胞因子，比较Th1和Th2细胞因子的测定量与患有明确克罗恩病和/或溃疡性结肠炎的患者中发现的相应量。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，由活化的1型T辅助细胞驱动的，在免疫活化中产生的细胞因子选自：IL-12、IFN-γ和TNF-α。

9.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于，由活化的2型T辅助细胞驱动的，在免疫活化中产生的细胞因子选自：IL-4和IL-5。

10.如权利要求7-9中任一项所述的方法，其特征在于，还包括测定样品中的IgG1作为克罗恩病的标记。

11.如权利要求8所述的方法，其特征在于，测定所述上清液中IL-12、IFN-γ和TNF-α中的任一种。

12.如权利要求9所述的方法，其特征在于，测定所述上清液中IL-4和IL-5中的任一种。

13.一种测定患者中是否存在克罗恩病的方法，所述方法包括提供怀疑患病的胃肠粘膜，特别是远端回肠或结肠粘膜或引流所述胃肠粘膜的警戒淋巴结的活检样品；制备该样品的单细胞悬液；从该细胞悬液分离mRNA；分析该分离的mRNA中CD69、Tbet、IFN-γ和TIM-3的两种或更多种的mRNA；比较该结果与从健康人相应获得的mRNA中CD69、Tbet、IFN-γ和TIM-3的两种或更多种相应mRNA的分析结果，患者mRNA样品中CD69、Tbet、IFN-γ和TIM-3的两种或更多种mRNA上调表示克罗恩病。

14.如权利要求13所述的方法在对克罗恩病分期或在监测克罗恩病治疗中的应用。

15.一种测定患者中是否存在溃疡性结肠炎的方法，所述方法包括提供怀疑患病的胃肠粘膜，特别是远端回肠或结肠粘膜或引流所述胃肠粘膜的警戒淋巴结的活检样品；制备该样品的单细胞悬液；从该细胞悬液分离mRNA；分析该分离的mRNA中CD69、GATA-3、IL-4和IL-5的两种或更多种的mRNA；比较该结果与从健康人相应获得的mRNA中CD69、GATA-3、IL-4和IL-5的两种或更多种相应mRNA的分析结果，患者mRNA样品中CD69、GATA-3、IL-4和IL-5的两种或更多种mRNA上调表示溃疡性结肠炎。

16.如权利要求15所述的方法在对溃疡性结肠炎分期或在监测溃疡性结肠炎治疗中的应用。

17.活检样品中的Tbet表达作为取得该样品的患者中克罗恩病分期标记的应用。

18.活检样品中的Tbet表达作为区分取得该样品的患者的克罗恩病的活动期和非活动期的标记的应用。