[发明专利]改良的用于二硫键形成的方法

权利要求书

1.一种用于通过在包含于噬菌体颗粒的外壳蛋白中的第一半胱氨酸 残基和包含于肽/蛋白质中的第二半胱氨酸残基之间形成二硫键而将所述 肽/蛋白质展示在噬菌体颗粒的表面上的方法，所述方法包括：

(a)在邻接包含于噬菌体颗粒的所述外壳蛋白中的所述第一半胱氨酸 残基或包含于所述肽/蛋白质中的所述第二半胱氨酸残基的5个氨基酸内， 人工地引入赖氨酸，

和

(b)引起或使得噬菌体颗粒的所述外壳蛋白连接于所述肽/蛋白质，

其中所述连接是通过在包含于噬菌体颗粒的所述外壳蛋白中的所述 第一半胱氨酸残基和包含于所述肽/蛋白质中的所述第二半胱氨酸残基之 间形成二硫键而引起，

且其中所述肽/蛋白质包括免疫球蛋白或其功能片段。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述赖氨酸被引入噬菌体颗粒的所 述外壳蛋白。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述赖氨酸被引入所述肽/蛋白质。

4.如权利要求1所述的方法，其中在噬菌体的所述外壳蛋白的N末端 或邻近噬菌体的所述外壳蛋白的N末端，人工地引入所述第一半胱氨酸残 基。

5.如权利要求1所述的方法，其中在所述肽/蛋白质的C末端或邻近 所述肽/蛋白质的C末端，人工地引入所述第二半胱氨酸残基。

6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中噬菌体颗粒的所述外壳 蛋白是

i)噬菌体颗粒的野生型外壳蛋白的截短的变体，其中所述截短的变体 包括至少引起所述外壳蛋白并入所述噬菌体颗粒的蛋白质外壳的所述野 生型外壳蛋白的那一部分

或

ii)噬菌体颗粒的野生型外壳蛋白的修饰的变体，其中所述修饰的变 体能够并入到所述噬菌体颗粒的蛋白质外壳。

7.如权利要求4所述的方法，其中噬菌体颗粒的所述外壳蛋白是野生 型外壳蛋白pIII或衍生自野生型外壳蛋白pIII。

8.一种可通过前述权利要求中任一项所述的方法获得的噬菌体颗粒 的不同集合，其中所述噬菌体颗粒中的每一个展示出肽/蛋白质的不同集合 中的肽/蛋白质。