[发明专利]双组分基因组黄病毒及其应用

权利要求书

1.一种双组分基因组黄病毒，所述病毒包含假性感染性病毒基因组和互补基因组，其中假性感染性病毒基因组编码RNA复制所需的顺式作用启动子元件、被膜蛋白和黄病毒的一整套非结构蛋白，而不编码黄病毒衣壳蛋白；互补基因组编码RNA复制所需的顺式作用启动子元件、衣壳蛋白和黄病毒的一整套非结构蛋白，而不编码黄病毒被膜蛋白。

2.权利要求1的双组分基因组黄病毒，其中所述假性感染性病毒基因组和所述互补基因组编码5′UTR和含有RNA复制所必需的环化序列的衣壳蛋白可读框的氨基端片段。

3.权利要求1的双组分基因组黄病毒，其中所述假性感染性病毒基因组或所述互补基因组包含与被膜蛋白或衣壳蛋白的编码序列融合的泛蛋白或口蹄疫(FAMDV)特异性2A蛋白酶。

4.权利要求1的双组分基因组黄病毒，其中所述假性感染性病毒基因组和所述互补基因组还包含：含有其它病毒、细菌或寄生虫的结构基因的额外遗传物质，其中所述基因的表达诱导针对所述病毒、细菌或寄生虫所导致感染的免疫应答。

5.权利要求1的双组分基因组黄病毒，其中所述黄病毒是黄热病病毒、西尼罗河病毒、登革热病毒、蜱传脑炎病毒、圣路易斯脑炎病毒、日本脑炎病毒、墨累谷脑炎病毒、典型猪瘟病毒或丙型肝炎病毒。

6.一种感染权利要求1的双组分基因组黄病毒的细胞培养系统。

7.权利要求6的细胞培养系统，其中所述细胞培养系统是Vero、BHK-21、C7/10或者脊椎动物来源或蚊来源的其它细胞。

8.一种大规模繁殖双组分基因组黄病毒的方法，所述方法包括：用权利要求1的双组分基因组黄病毒感染细胞培养系统，所述病毒能在同一细胞中有效复制这两个基因组；并释放所述双组分基因组黄病毒，因而能大规模繁殖双组分基因组黄病毒。

9.权利要求8的方法，其中所述细胞培养系统用所述双组分基因组黄病毒感染，其感染复数大于1感染单位/细胞。

10.权利要求8的方法，其中所述复制缺陷黄病毒是复制缺陷型的，不能引起疾病、感染，但能在体内进行一轮感染。

11.一种免疫原性组合物，所述组合物包含：权利要求1的双组分基因组黄病毒、佐剂、药学上可接受的载体或它们的组合。

12.一种保护受试者免受暴露于黄病毒导致的感染的方法，所述方法包括：给予所述受试者免疫有效量的权利要求11的免疫原性组合物，其中所述组合物在所述受试者体内诱发针对黄病毒的免疫应答，从而保护所述受试者免受暴露于黄病毒导致的感染。

13.权利要求12的方法，其中所述给予是通过腹膜内、皮内、皮下、肌内、口服或鼻内途径。

14.权利要求12的方法，其中所述黄病毒是黄热病病毒、西尼罗河病毒、登革热病毒、蜱传脑炎病毒、圣路易斯脑炎病毒、日本脑炎病毒、墨累谷脑炎病毒、典型猪瘟病毒或丙型肝炎病毒。