[发明专利]利用差异化衍生质谱法检测异构体

权利要求书

1.一种评价支链氨基酸的分子异构体的方法，该方法包括：

使样品中的支链氨基酸的一种或多种分子异构体衍生，所述样品包括用一个或多个重原子标记作为第一标准物的支链氨基酸；

在衍生之后将用一个或多个重原子标记作为第二标准物的未衍生或衍生支链氨基酸加入到所述样品中；

利用串联质谱法评价所述样品；和

检测指示所述样品中一种或多种支链氨基酸的衍生和未衍生形式的峰。

2.权利要求1的方法，其中所述第一标准物和所述第二标准物的衍生形式由于不同的重原子标记而具有不同的分子量。

3.权利要求1的方法，其中所述第一标准物和所述第二标准物的未衍生形式由于不同的重原子标记而具有不同的分子量。

4.权利要求1的方法，还包括参照所述第一标准物和所述第二标准物确定支链氨基酸的衍生效率。

5.权利要求4的方法，还包括利用所述衍生效率确定所述样品中的支链氨基酸的浓度。

6.权利要求1的方法，其中支链氨基酸的异构体包括亮氨酸、异亮氨酸和别异亮氨酸中的一种或多种。

7.权利要求1的方法，其中所述衍生包括酯化。

8.权利要求7的方法，其中所述酯化使用醇进行。

9.权利要求8的方法，其中所述醇选自丁醇、异丙醇、乙醇和甲醇。

10.权利要求1的方法，其中小于100％的支链氨基酸衍生。

11.权利要求1的方法，其中所述第一标准物选自亮氨酸、异亮氨酸和别异亮氨酸。

12.权利要求1的方法，其中所述第二标准物选自亮氨酸、异亮氨酸和别异亮氨酸。

13.权利要求1的方法，其中所述检测包括获取代表氨基酸的丁基化和未丁基化形式的数据峰。

14.一种诊断代谢紊乱的方法，该方法包括：

在使样品中的支链氨基酸衍生的条件下处理源自受验者的样品，所述样品包括用一个或多个重原子标记作为第一标准物的支链氨基酸；

在衍生之后将用一个或多个重原子标记作为第二标准物的未衍生或衍生支链氨基酸加入到所述样品中；

利用串联质谱法评价所述样品；和

检测指示所述样品中一种或多种支链氨基酸的衍生和未衍生形式的峰，

其中相对于一种或多种参照样品中的浓度，所述样品中一种或多种支链氨基酸的改变浓度是所述受验者具有产生代谢紊乱的风险或正处于产生代谢紊乱的风险之中的指示，所述代谢紊乱由支链氨基酸和支链酮酸之一或支链氨基酸和支链酮酸两者的改变浓度表征。

15.权利要求14的方法，其中所述代谢紊乱为槭尿糖紊乱(MSUD)。

16.权利要求14的方法，其中所述受验者为人。

17.权利要求14的方法，其中所述受验者为新生儿。

18.权利要求14的方法，还包括参照所述第一标准物和所述第二标准物确定支链氨基酸的衍生效率。

19.权利要求18的方法，还包括利用所述衍生效率确定所述样品中的支链氨基酸的浓度。

20.权利要求14的方法，其中所述支链氨基酸的异构体包括亮氨酸、异亮氨酸和别异亮氨酸中的一种或多种。

21.权利要求14的方法，其中所述衍生包括酯化。

22.权利要求14的方法，其中所述第一标准物和所述第二标准物的衍生形式由于不同的重原子标记而具有不同的分子量。

23.权利要求14的方法，其中所述第一标准物和所述第二标准物的未衍生形式由于不同的重原子标记而具有不同的分子量。

24.一种用于评价支链氨基酸的异构体的试剂盒，该试剂盒包括：

用一个或多个重原子标记的未衍生支链氨基酸第一标准物；和

用一个或多个重原子标记的未衍生或衍生支链氨基酸第二标准物，

其中所述第一标准物和所述第二标准物的衍生形式由于不同的重原子标记而具有不同的分子量。

25.权利要求24的试剂盒，还包括用于检测支链氨基酸的计算机软件。

26.权利要求24的试剂盒，其中所述支链氨基酸包括亮氨酸、异亮氨酸和别异亮氨酸中的一种或多种。