[发明专利]对于有机介质中的亲水性底物具有高耐受性的改性的固定化酶

权利要求书

1.一种固定于固体载体上的改性的界面酶，所述酶为脂肪酶或磷脂 酶，其中，所述酶共价地被覆有脂质基团，从而为疏水性微环境所包围， 避免所述酶在亲水性试剂、底物和/或反应产物存在下失活和/或聚集，其 中，所述脂质基团的被覆通过使脂质环氧化物经由其初始的环氧基团与 酶的表面官能团共价结合而实现，其中，所述载体是通过吸附或通过共 价结合于官能团上而能够结合所述酶的疏水性聚合物载体，所述疏水性 聚合物载体选自疏水性脂肪族丙烯酸类交联聚合物或疏水性芳香族交联 聚合物，而且所述脂质环氧化物选自脂肪酸环氧化物、脂肪酸烷基酯环 氧化物、糖脂肪酸酯环氧化物、中链和长链烷基糖苷环氧化物、磷脂环 氧化物和聚乙二醇环氧化物衍生物。

2.如权利要求1所述的界面酶，其中，所述载体是多孔载体。

3.如权利要求1所述的界面酶，其中，所述酶选自由源自南极假丝 酵母(Candida antarctica)、皱褶假丝酵母(Candida rugosa)、米黑根毛霉 (Rhizomucor miehei)、假单胞菌(Pseudomonas sp.)、雪白根霉(Rhizopus  niveus)、米黑毛霉(Mucor miehei)、爪哇毛霉(Mucor javanicus)、米根霉 (Rhizopus oryzae)、黑曲霉(Aspergillus niger)、卡门柏青霉(Penicillium  camembertii)、产碱杆菌(Alcaligenes sp.)、伯克霍尔德氏菌(Burkholderia  sp.)、疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosa)、粘稠色杆菌 (Chromobacterium viscosum)和木瓜籽的酶组成的组。

4.一种用于制备固定于不溶性载体上的改性的界面酶的方法，所述 酶为脂肪酶或磷脂酶，所述载体是通过吸附或通过共价结合于官能团上 而能够结合所述酶的疏水性聚合物载体，所述疏水性聚合物载体选自疏 水性脂肪族丙烯酸类交联聚合物或疏水性芳香族交联聚合物，所述方法 包括以下步骤：

(a)提供由水性缓冲溶液和至少一种含有脂质环氧化物的有机溶剂 组成的双相体系，其中所述脂质环氧化物选自脂肪酸环氧化物、脂肪酸 烷基酯环氧化物、糖脂肪酸酯环氧化物、中链和长链烷基糖苷环氧化物、 磷脂环氧化物和聚乙二醇环氧化物衍生物；

(b)将所述界面酶与步骤(a)所提供的双溶剂体系混合；

(c)将所述载体加入到步骤(b)的混合物中并进行混合；

(d)从步骤(c)所获得的混合物中分离出固定于所述载体上的所述界 面酶。

5.如权利要求4所述的方法，其中，所述载体是多孔载体。

6.如权利要求4所述的方法，其中，所述有机溶剂选自烷类、醚类、 醇类、醛类和酮类以及它们的任何混合物。

7.如权利要求4所述的方法，其中，所述有机溶剂选自正辛烷、异 辛烷、正己烷、正辛醇二异丙基醚和油类甘油三酯。

8.如权利要求4～7中任一项所述的方法，其中，所述疏水性脂肪 族丙烯酸类交联聚合物为Amberlite^R XAD 7HP，和所述疏水性芳香族交 联聚合物为Amberlite^R XAD 1600。