[发明专利]测量凝血酶受体拮抗剂对血小板聚集的抑制的方法

权利要求书

1.用于测量凝血酶受体拮抗剂对血小板聚集的抑制的方法，该方法包括如下步骤：

a)提供来自用凝血酶受体拮抗剂处理的个体的含有血小板的血液样品；

b)在适合在所述含有血小板的血液样品中激活血小板聚集的条件下，使所述的含有血小板的血液样品与凝血酶受体激活剂接触；和

c)评估所述含有血小板的血液样品中的血小板聚集以测定在所述个体中凝血酶受体拮抗剂对血小板聚集的抑制是否存在和/或抑制的程度，其中，没有所述的血小板聚集或血小板聚集的减少表明所述个体形成血小板聚集的能力响应所述凝血酶受体拮抗剂处理而降低。

2.权利要求1的方法，其中所述凝血酶受体为PAR-1或PAR-4。

3.权利要求1的方法，其中所述凝血酶受体激活剂包括选自下组的物质：凝血酶、PAR-1凝血酶受体激活肽(TRAP-1)和PAR-4凝血酶受体激活肽(TRAP-4)。

4.权利要求3的方法，其中所述凝血酶的终浓度为大约0.01U/ml至大约0.5U/ml。

5.权利要求3的方法，其中所述TRAP-1的终浓度为大约0.5μM至大约10μM。

6.权利要求3的方法，其中所述TRAP-4的终浓度为大约50μM至大约1mM。

7.权利要求1的方法，其中所述凝血酶受体激活剂包含TRAP-1。

8.权利要求1的方法，其中所述含有血小板的血液样品为全血样品。

9.权利要求1的方法，其中所述含有血小板的血液样品为血浆样品。

10.权利要求9的方法，其中所述血浆样品为富含血小板的血浆(PRP)样品。

11.权利要求1的方法，其中所述凝血酶受体拮抗剂包含选自下组的物质：凝血酶受体的凝血酶结合域的抗体、TRAP-1的肽衍生物、TRAP-4的肽衍生物、TRAP-1衍生物的模拟肽、TRAP-4衍生物的模拟肽、E5555和SCH530348。

12.权利要求11的方法，其中所述凝血酶受体拮抗剂包含E5555。

13.权利要求11的方法，其中所述凝血酶受体拮抗剂包含SCH 530348。

14.权利要求1的方法，其中所述凝血酶受体激活剂包含在吸收峰位于约800nm的测定介质中。

15.权利要求1的方法，其是在30℃至40℃的温度范围下进行的，并且从含有血小板的血液样品与凝血酶受体激活剂接触的时刻起总读取时间为大约10秒至大约10分钟。

16.权利要求1的方法，其中在一次使用性测定装置中使所述含有血小板的血液样品与所述凝血酶受体激活剂接触。

17.用于测量凝血酶受体拮抗剂对血小板聚集的抑制的方法，其包括如下步骤：

a)提供来自用凝血酶受体拮抗剂处理的个体的含有血小板的血液样品；

b)使所述的含有血小板的血液样品与凝血酶受体激活剂和包含固定在其上的GPIIb/IIIa受体配体的颗粒在适合于所述颗粒通过所述血小板的介导在所述血液中凝集的条件下接触；和

c)评估所述凝集以测定在所述个体中所述凝血酶受体拮抗剂对血小板聚集的抑制的是否存在和/或抑制的程度，其中，没有所述凝集或所述凝集的减少表明所述个体形成血小板聚集的能力响应所述凝血酶受体拮抗剂处理而降低。

18.权利要求17的方法，其中所述凝血酶受体为PAR-1或PAR-4。

19.权利要求17的方法，其中所述凝血酶受体激活剂包含选自下组的物质：凝血酶、PAR-1凝血酶受体激活肽(TRAP-1)和PAR-4凝血酶受体激活肽(TRAP-4)。

20.权利要求19的方法，其中所述凝血酶的终浓度为大约0.01U/ml至大约0.5U/ml。

21.权利要求19的方法，其中所述TRAP-1的终浓度为大约0.5μM至大约10μM。

22.权利要求19的方法，其中所述TRAP-4的终浓度为大约50μM至大约1mM。

23.权利要求17的方法，其中所述凝血酶受体激活剂包含TRAP-1。