[发明专利]包含NKT活化剂、CD40激动剂和任选的抗原的佐剂组合,及其诱导细胞免疫协同增强的用途

说明书

发明领域

本发明总体上来说涉及协同佐剂组合，其上调免疫细胞表 达CD70和促进抗原特异性细胞免疫。更特别地，本发明涉及具体的协 同组合，包括自然杀伤T细胞(NKT)活化剂，例如α-半乳糖苷神经酰 胺(α-Gal-Cer)或iGb3，和CD40激动剂，例如拮抗性抗CD40抗体 或CD40L多肽或缀合物，和进一步任选地，包括靶抗原。更进一步本 发明还提供了新的免疫疗法，包括给予这种协同佐剂组合或蛋白缀合 物以提高抗原特异性细胞免疫，即CD8+免疫。具体地说，也教导了包 含这些佐剂组合和/或多肽缀合物的组合物作为免疫佐剂用于治疗各 种慢性疾病，包括癌症、传染病、自身免疫病、过敏性或炎症性疾病 的用途。

发明背景

身体抗微生物的防御系统以及身体抵抗其他慢性疾病例 如影响细胞增殖的疾病的防御物是通过先天免疫系统的早期反应和适 应性免疫系统的迟发反应介导的。先天免疫包括识别例如是微生物病 原体特征性的结构的机制和在哺乳动物细胞中不存在的机制。这种结 构的实例包括细菌脂多糖(LPS)、病毒双链DNA、和非甲基化CpG DNA 核苷酸。先天免疫反应系统的效应细胞包括中性白细胞、巨噬细胞和 自然杀伤细胞(NK细胞)。除先天免疫之外，脊椎动物，包括哺乳动物， 具有进化的免疫防御系统，其通过接触传染物而被刺激，和每次连续 接触特定抗原，幅度和有效性增加。由于它适应特异性感染或抗原损 害的能力，这个免疫防御机制已被描述为适应性免疫。有两种类型的 适应性免疫反应，称为体液免疫，包括B淋巴细胞产生的抗体，和细 胞免疫，由T淋巴细胞介导。

已经描述过两种类型的主要T淋巴细胞，CD8+细胞毒性淋 巴细胞(CTLs)和CD4辅助细胞(Th细胞)。CD8+T细胞是效应细胞， 通过T细胞受体(TCR)识别由I类MHC分子呈递的例如感染病毒或细菌 的细胞上的外来抗原。识别外来抗原时，CD8+细胞经历活化、成熟和 增殖过程。这个分化过程产生CTL克隆，其具有破坏显示外来抗原的 靶细胞的能力。另一方面T辅助细胞参与在体液和细胞介导的两种效 应免疫反应形式中。至于体液或抗体免疫反应，B淋巴细胞通过与Th 细胞相互作用而产生抗体。具体地说，细胞外抗原，例如循环微生物 被特异性抗原呈递细胞(APCs)接受、加工、并与II类主要组织相容性 复合体(MHC)分子结合而呈递给CD4+Th细胞。随后这些Th细胞激活 B淋巴细胞，引起抗体产生。相反，细胞介导的或细胞的免疫反应， 发挥作用中和定居在细胞内位置的微生物，例如靶细胞成功感染后。 外来抗原，例如微生物抗原，在感染细胞内合成并与I类MHC分子结 合重置于这种细胞表面上。这种表位的呈递引起上述CD8+CTLs受刺 激，随后被CD4+Th细胞刺激也是这个过程。Th细胞由至少两个不同 的亚群，称为为Th1和Th2细胞组成。Th1和Th2亚型代表Th细胞两 极分化的群，它们在接触抗原后从共同的前体分化出。

每个T辅助细胞亚型分泌细胞因子，细胞因子促进彼此相 反的不同免疫效果并交叉调节彼此的扩展和作用。Th1细胞分泌大量 细胞因子，例如干扰素(IFN)γ、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素 -2(IL-2)和IL-12，和少量IL-4。Th1结合细胞因子促进CD8+细胞毒 性T细胞(CTL)活性和最常伴发细胞介导的抗细胞内病原体的免疫反 应。相反，Th2细胞分泌大量细胞因子，例如IL-4、IL-13和IL-10， 而分泌少量IFN-γ，并促进抗体反应。Th2反应与体液反应特别相关， 例如保护不受炭疽病的损害和消除蠕虫感染。

所产生的免疫反应是Th1还是Th2驱动的很大程度上取决 于所涉及的病原体和细胞环境中的因素，例如细胞因子。不能激活T 辅助反应，或正确的T辅助亚类，不仅可导致不能产生足够的反应来 对抗特定病原体，而且对于抗再感染产生的免疫力也低。很多传染物 是细胞内病原体，其中预期细胞介导的反应，以Th1免疫举例说明， 将在保护和/或治疗中起重要作用。此外，对于很多这些感染，已经表 明诱导不适当的Th2反应消极地影响疾病后果。实例包括结核分枝杆 菌、曼氏血吸虫(S.mansoni)，以及起反作用的Th2样占优势的免疫 反应。瘤型麻风(Lepromatous leprosy)看来特征是流行但不适当的 Th2样反应。HIV感染代表另一个实例。在那里，已经提示Th1样细胞 与其他Th细胞群的比值降低可能在疾病症状进展中起着决定性作用。