[发明专利]速效型核酸转运用载体组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种在将核酸给予来自动物的细胞或生物时能将核酸 高效地转运至细胞内的、毒性低且安全性高的核酸转运用载体组合物、 以及核酸转运用组合物。

背景技术

近年，随着生物技术的发展，已经发现了多种在细胞内发挥生理活 性功能的核酸。例如，已知siRNA(small interfering RNA：小干涉RN A)可引起存在于细胞内的靶基因的mRNA分解，阻碍靶基因表达(R NA interference：RNA干涉)。由RNA干涉产生的阻碍靶基因表达的 功能对缓解或治疗由特定的基因或基因组的异常表达而引起的疾病有 用，故人们期待将siRNA开发用作治疗药。但是，为了将以siRNA为 首的核酸用作治疗药，重要的是使siRNA在靶细胞内发挥功能，因此， 确立使核酸有效地转运至靶细胞内的技术必不可少。

作为将外源性核酸分子或基因转运至细胞内的技术，已知有利用载 体(运载体)的技术。运载体包括病毒性运载体和非病毒性运载体。病 毒性运载体显示出高基因导入效率，但病原性、免疫原性、细胞毒性等 在安全性方面存在许多不明之处。因此期望开发安全性更高的非病毒运 载体。

目前为止，作为促进siRNA等核酸向细胞内转运的非病毒性核酸转 运用载体，例如专利文献1中公开了一种具有特定结构的阳离子性脂 质。但是，专利文献1中公开的阳离子性脂质具有在给予培养细胞或生 体时呈现毒性的缺点。另外，专利文献2中，作为毒性较低、可将siRNA 转运至细胞内的载体组合物，公开了含有两亲性化合物及聚阳离子的组 合物。但是，即使是专利文献2中公开的组合物，在将充分量的siRNA 导入细胞内时，由于其对细胞的毒性变得明显，所以在安全性方面依然 存在问题。

以上述现有技术为背景，人们期待开发出毒性低、能够使以siRNA 为代表的核酸高效率地转运到细胞内的核酸转运用载体组合物。

专利文献1：特表2002-529439号公报

专利文献2：特表2005-508394号公报

发明内容

因此，本发明的目的在于解决上述现有技术中存在的问题。具体而 言，本发明的目的在于提供一种在将siRNA等核酸给予来自动物的细胞 或动物时能使核酸高效地转运至细胞内，且显示出低毒性和高安全性的 核酸转运用载体组合物；并提供一种含有该载体组合物和核酸的核酸转 运用组合物。另外，本发明的其他目的在于提供一种能以高安全性将核 酸高效地转运至细胞内的、向细胞内导入核酸的方法。

本发明人等为了解决上述问题进行了潜心研究，结果发现组合含有 (A)二酰基磷脂酰胆碱、(B)胆固醇及/或其衍生物及(C)脂肪族 伯胺的组合物，毒性低、显示出高安全性，且能有效地使核酸转运至细 胞内，作为核酸转运用载体是有用的。另外发现，特别是通过将含有上 述成分(A)～(C)的组合物制成脂质体形态进行使用，能够同时具 有更加优异的安全性及核酸导入性。本发明是基于上述发现，通过进一 步反复研究而完成的。

即，本发明提供下述发明：

项1、一种核酸转运用载体组合物，其特征在于，含有(A)二酰 基磷脂酰胆碱、(B)选自胆固醇及其衍生物中的至少一种及(C)脂 肪族伯胺。

项2、如项1所述的核酸转运用载体组合物，其中，成分(A)为 酰基部分的碳原子数为4～23的二酰基磷脂酰胆碱。

项3、如项1或2所述的核酸转运用载体组合物，其中，成分(B) 为胆固醇。

项4、如项1所述的核酸转运用载体组合物，其中，成分(C)为 碳原子数为10～20的烷基胺。

项5、如项1所述的核酸转运用载体组合物，其中，成分(A)是 选自二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱和二硬脂酰磷脂酰胆 碱中的至少一种，成分(B)为胆固醇，且成分(C)为硬脂胺。

项6、如项1所述的核酸转运用载体组合物，其中，成分(A)∶ (B)成分∶(C)成分的摩尔比为5～9∶1～5∶1。

项7、如项1所述的核酸转运用载体组合物，是siRNA转运用载体。

项8、如项1所述的核酸转运用载体组合物，是由成分(A)～(C) 形成脂质体膜的脂质体制剂。

项9、一种核酸转运用组合物，含有核酸及项1所述的核酸转运用 载体组合物。