[发明专利]靶向人FAK和PLK1基因的RNA干扰表达质粒-阳离子脂质体-肝素抗肿瘤复合物

权利要求书

1.一种RNA干扰表达载体，其特征在于：它能在体内表达针对FAK基因上由SEQ ID NO.1所示靶点的RNA干扰序列和针对PLK1基因上由SEQ ID NO.2所示靶点的RNA干扰序列；所述表达针对FAK基因上由SEQ ID NO.1所示靶点的RNA干扰序列的表达框架的正义链序列为SEQ ID NO.3所示，表达框架反义链序列为SEQ ID NO.4所示；所述表达针对PLK1基因上由SEQ ID NO.2所示靶点的RNA干扰序列的表达框架正义链序列为SEQ ID NO.5所示，表达框架反义链序列为SEQ ID NO.6所示。

2.根据权利要求1所述的RNA干扰表达载体，其特征在于：具有SEQ ID NO.7所示的序列。

3.权利要求1或2所述的RNA干扰表达载体的脂质体复合物。

4.根据权利要求3所述的脂质体复合物，其特征在于：所述的脂质体为阳离子脂质体。

5.根据权利要求4所述的脂质体复合物，其特征在于：所述的阳离子脂质体由摩尔比为1∶1的DOTAP和胆固醇组成。

6.根据权利要求3～5任一项所述的脂质体复合物，其特征在于：脂质体复合物中还含有肝素。

7.根据权利要求6所述的脂质体复合物，其特征在于：所述脂质体复合物中脂质体、RNA干扰表达载体、肝素的重量配比为脂质体∶RNA干扰表达载体∶肝素＝25～30∶10∶1～1.5。

8.权利要求1或2所述的RNA干扰表达载体或权利要求3～7任一项所述的脂质体复合物在制备抗肿瘤药物组合物中的用途。

9.一种抗肿瘤药物组合物，是由权利要求1或2所述的RNA干扰表达载体或权利要求3～7任一项所述的脂质体复合物作为主要活性成分添加药学上可以接受的辅料制备而成。

10.根据权利要求9所述的抗肿瘤药物组合物，其特征在于：还含有肿瘤化疗药物作为活性成分。

11.一种制备权利要求1或2任一项所述的RNA干扰表达载体的方法，其特征在于包括以下步骤：

a、分别设计并合成能表达SEQ ID NO.1所示的FAK基因的RNA干扰序列的表达框架序列和SEQ ID NO.2所示的PLK1基因的RNA干扰序列的表达框架序列；

b、将a步骤所得表达框架序列转入目标表达载体，使表达框架序列能由启动子操作表达，扩增筛选即得。

12.一种制备权利要求7所述脂质体复合物的方法，其特征在于包括以下步骤：

a、将DOTAP与胆固醇按1∶1的摩尔比进行混合，制成DOTAP/Chol阳离子脂质体混悬液；

b、按重量配比为脂质体∶RNA干扰表达载体∶肝素＝25～30∶10∶1～1.5的比例准备原料，将 脂质体溶液加入到RNA干扰表达载体的溶液中，振荡后在4摄氏度下孵化，再加入肝素，在4摄氏度下再孵化2个小时，得到RNA干扰表达载体-阳离子脂质体-肝素复合物。