[发明专利]一种南瓜多糖及其制备方法

说明书

(一)技术领域：

本发明涉及一种南瓜多糖及其制备方法，属于药用活性成分的提取技术领域。

(二)背景技术：

南瓜不但具有非常高的营养价值，而且还具有极高的药用价值，其中最为人们所熟知的药用、保健功能是抗糖尿病。南瓜中所含有的多糖等成份是其抗糖尿病的主要有效物质。目前利用南瓜的抗糖尿病作用，通常是将南瓜脱水干燥磨粉，制成南瓜粉后冲服。这种方法制得的产品所含药用成份低，服用量大，疗效不显著，服用不够方便。近年已有从南瓜中提取分离出具有明显降血糖效果的南瓜多糖的公开报道。在公开的文献报道中，南瓜多糖的提取多采用水提取乙醇沉淀法。水提乙醇沉淀法提取南瓜多糖，普遍存在着工艺复杂、流程繁琐和提取率低、多糖含量低、成本高的问题。

CN1624001A公开了南瓜多糖的制备方法：先将南瓜制成南瓜粉，再用热水抽提，滤液用乙醇沉淀，沉淀物洗涤后加入三氯醋酸，冰箱中放置过夜，离心，所得滤液逆水透析后干燥，即得产物。该方法存在着提取时间较长，工艺复杂，流程繁琐，沉淀物需要经过多次洗涤，加入三氯醋酸脱蛋白后还需经过逆水透析、双蒸水透析，生产周期长，多糖提取率低，纯度不高的问题。

(三)发明内容：

本发明所要解决的技术问题是：利用现代生物方法从南瓜中提取、分离、纯化南瓜多糖，其工艺流程简单、生产周期短、多糖提取率高且产品纯度高。

本发明是这样实现的：南瓜多糖的制备方法为：取南瓜，洗净，去籽后切片，粉碎，加水提取0.5～3h，过滤，收集滤液；滤渣再加水提取2次，每次0.5～3h，过滤，收集滤液；合并滤液，离心，上清液过树脂柱进行柱层析，用水清洗树脂，收集洗脱液；洗脱液浓缩后，加入80％～95％乙醇进行沉淀；沉淀物用水溶解后加入5％～15％三氯醋酸离心，脱去蛋白质，取上清液进行浓缩，干燥，粉碎，即得南瓜多糖。由于多糖类成分在水中的溶解度较大，而且和乙醇相比，用水作提取溶剂的成本明显降低，因此本发明在对南瓜进行初提和再提时均以水为提取溶剂。柱层析可以通过吸附很好地去除提取液中的黄酮类物质及色素，在杂质量更少的情况下，后续的醇沉效果更好，沉淀物无须经过多次洗涤。

更具体的制备方法为：取南瓜，洗净，去籽后切片，粉碎，用4～12倍重量的水提取0.5～3h，过滤，收集滤液；滤渣再分别加4～12倍重量的水提取2次，每次0.5～3h，过滤，收集滤液；合并滤液，离心，上清液过树脂柱进行柱层析，用0.1～3倍进柱液重量的水清洗树脂，收集洗脱液；将其浓缩至洗脱液体积的1/20～1/5倍，然后加入3～12倍重量的80％～95％乙醇溶液进行沉淀，静置5～10h；沉淀物用1～8倍重量的水溶解后，加入0.5～2倍重量的5％～15％三氯醋酸，搅拌后静置6～10h，离心，除去蛋白质，取上清液进行浓缩，制膏，冷冻干燥，粉碎，即得南瓜多糖。

上述制备过程中，南瓜洗净后最好切成长4～10cm、宽2～6cm、厚2～6cm的片，用粉碎机粉碎至20～200目的颗粒，以便于搅拌，使有效成分的提取更为完全。为了提高南瓜多糖的品质，在选取原料的时候，尽量选择口感甜、淀粉多，外观平滑、肉质硬且厚，成熟、无霉坏的南瓜，清洗时去除瓜柄、瓜蒂并剔除虫叮咬部份后，先用清洁球或毛刷或抹布擦洗，再用洁净饮用水冲洗干净。

南瓜粉碎物提取时的料液温度以及滤渣再提取时的料液温度均为50～120℃，优选为80～100℃。可将南瓜粉碎物置于提取罐中，输入蒸汽进行加热。

南瓜的提取液均用50～300目滤网进行过滤。

柱层析过程用水清洗树脂时，当流出液呈浅黄色的时候开始收集洗脱液，流出液呈无色时，停止洗脱、收集；树脂柱用50％～95％的乙醇溶液清洗处理，洗去树脂吸附的色素和黄酮类物质。

柱层析所用树脂柱为HPD100型、D101型、AB-8型或D201型大孔吸附树脂。申请人经过筛选实验发现，这几种大孔吸附树脂对南瓜多糖的纯化效果更好，而且其价格便宜，可以多次重复使用，成本很低。

洗脱液采用真空浓缩，浓缩温度为40～80℃(温度太低不利于浓缩、温度太高则对有效成分有破坏作用)，真空度0.06～0.085MPa。

南瓜提取及纯化过程所用的水为纯化水、去离子水或饮用水。

以上所述南瓜多糖的制备方法制备得到的南瓜多糖。