[发明专利]用一类基于与组氨酸结合生成荧光基团的铱配合物标记抗体

权利要求书

1.一种新型生物标记方法，该方法使用一类由两个相同的C^N二齿配体以及两个溶剂分子配位络合的环金属铱配位化合物标记抗体、多肽和蛋白质，被标记对象的氨基酸序列中至少含有一个组氨酸残基。

2.根据权利要求1所述的环金属铱配位化合物具有如下的化学分子式：(L_C^N)₂Ir(L_solv)₂[OTf]其结构为：

其中，L_C^N代表C^N二齿配体，L_solv代表溶剂分子，OTf代表三氟甲基磺酸根。

3.根据权利要求2所述的环金属铱配位化合物中的C^N二齿配体L_C^N包括但不局限于2-苯基吡啶、1-苯基异喹啉、2-苯基苯并噻吩、苯并喹啉、4-甲基苯基吡啶、4，6-二氟苯基吡啶、2-(苯并噻吩)吡啶、2-苯基喹啉和2，5-二苯基恶唑。

4.根据权利要求2所述的环金属铱配位化合物中的溶剂分子包括但不限于水、乙腈、DMF和DMSO。

5.根据权利要求1所述的环金属铱配位化合物用于荧光标记的抗体分子，包括但不局限于天然纯化获得的抗体、体外重组表达的抗体、各类抗体亚型(IgG，IgM，IgA，IgD，IgE等)、来源于各类物种的抗体分子(人，小鼠，大鼠，羊，兔，鸡，马，驴，荷兰猪，骆驼等)、多克隆抗体、单克隆抗体、Fab片段、Fab’片段和Fc片段。

6.根据权利要求1所述的环金属铱配位化合物用于荧光标记的多肽和蛋白质，包括但不局限于人工合成多肽、体外重组表达多肽、生物体内提纯多肽、人工合成蛋白质、体外重组表达蛋白质、生物体内提纯蛋白质、含天然分子序列的多肽或蛋白质、含人工设计序列的多肽或蛋白质、多肽类药物制剂和蛋白质类药物制剂等。

7.根据权利要求6所述的多肽是指含有n个氨基酸残基的由酰胺键构成主链结构的链状分子(2≤n≤50)。

8.根据权利要求1所述的环金属铱配位化合物用于标记生物活性分子的过程中使用常规缓冲液体系，包括但不局限于磷酸缓冲液(PBS)、Tris缓冲液、Bis-Tris缓冲液、MES缓冲液和HEPES缓冲液。

9.根据权利要求4所述的标记后的抗体分子用于基于免疫方法的生物检测，包括但不局限于基于光致发光的免疫分析(酶联免疫分析，如双抗体夹心法、间接法、间接双抗体夹心法、抗原直接包被法，时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved Fluorescence)，荧光能量共振转移免疫分析(Resonance Energy Transfer))、基于电化学发光(Electrochemiluminescence)的免疫分析方法、细胞及组织切片免疫染色(标记一抗用于免疫染色、标记二抗用于免疫染色、多重染色)和免疫分子印迹等。

10.根据权利要求5所述的标记后的多肽和蛋白质进一步用于生物医学样品标记、核酸或多肽药物组装，包括但不局限于体内(in vivo)或体外(in vitro)的生物检测、细胞染色、动物组织标记和药物组装与标记等实验。