[发明专利]一种用于检测猪繁殖与呼吸综合症病毒的试剂盒和检测方法有效
| 申请号: | 200810241706.1 | 申请日: | 2008-12-26 |
| 公开(公告)号: | CN101463395A | 公开(公告)日: | 2009-06-24 |
| 发明(设计)人: | 刘湘涛;田宏;吴锦艳;尚佑军;尹双辉;靳野 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 深圳市中知专利商标代理有限公司 | 代理人: | 吕晓蕾 |
| 地址: | 730046甘*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 检测 繁殖 呼吸 综合症 病毒 试剂盒 方法 | ||
1.一组针对猪繁殖与呼吸综合症病毒的引物,其特征在于,所述引物包括:
第一对的上游引物,其序列为SEQ ID NO:1;
第一对的下游引物,其序列为SEQ ID NO:2;
第二对的上游引物,其序列为SEQ ID NO:3,
第二对的下游引物,其序列为SEQ ID NO:4;
第三对的上游引物,其序列为SEQ ID NO:5,
第三对的下游引物,其序列为SEQ ID NO:6;
2.一种用于猪繁殖与呼吸综合症病毒的检测试剂盒,其特征在于,所述试 剂盒包含RNA酶抑制剂、AMV逆转录酶、Taq酶、无RNA酶水、One Step RNA PCR混合液、阴性对照以及序列SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:6引物的混合物。
3.权利要求2所述的检测试剂盒,其特征在于,所述One Step RNA PCR 混合液包含PCR缓冲液、dNTP和Mg2+。
4.权利要求2所述的检测试剂盒,其特征在于,所述阴性对照为无RNA酶 水空白对照。
5.权利要求2所述的检测试剂盒,其特征在于,所述阳性对照为PRRSV HuN4细胞株的RNA,浓度为0.25μg/mL。
6.权利要求2所述的检测试剂盒,其特征在于,所述RNA酶抑制剂的浓度 为40U/μL,AMV逆转录酶的浓度为5U/μL,Taq酶的浓度为5U/μL,引物的 浓度为50pM/μL,One Step RNA PCR混合液中PCR缓冲液的浓度为10×, dNTP的浓度为10mM和Mg2+的浓度为25mM。
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