[发明专利]一种采集、回收痕量DNA的试剂及试剂盒和应用方法

说明书

技术领域

本发明涉及法医物证生物学、人类学、刑侦学等领域的个体识别、亲子鉴定等DNA检 测、鉴定技术，具体地说是一种采集、回收痕量DNA的试剂及含有该试剂的试剂盒和应用 方法。

背景技术

在法医侦检工作中，犯罪现场的法医学物证的鉴定和检出，对于及时有效地指证犯罪 分子，打击犯罪起到至关重要的作用。

在实际案例中，嫌疑人或事件责任人往往在现场遗留有汗潜指纹。以往对现场指纹一 直从形态学线条特征进行比对达到个体认定的目的，随着作案手段的日趋多样化、复杂化， 单纯依靠形态学线条特征认定个体已经不能满足案件侦破的需要。DNA检测技术的发展， 为汗潜指纹的DNA检验鉴定提供了条件，利用高科技生物技术检出犯罪现场的痕量残留 DNA，可为找出或指证犯罪嫌疑人提供科学依据。

短串联重复序列(short tandem repeat，STR)是广泛存在于人类基因组中的一类具有 长度多态性的DNA序列.它由2～6个碱基对构成核心序列，呈串联重复排列，其长度多态性 主要由核心序列拷贝数目的变化而产生。一般认为，人类基因组平均每6～10kb就有1个 STR基因座，不同STR基因座的组合产生了极为丰富的基因座图谱信息，为法医物证学中的 个人识别和亲子鉴定提供了基础。STR-DNA分型技术的科学性和实用性也得到广大司法部 门和社会各界的一致认可和高度重视，从而在各类案件和事件的调查中发挥其作用。

然而，由于犯罪现场的DNA残留量甚微，痕量法医物证DNA采集、回收率低是导致 后续的DNA检出率低，STR分型失败，不能指认犯罪个体的主要原因。

目前，已有大量研究和文献报道犯罪现场痕量DNA提取与STR分型的案例(步嵘and 王耀平1999；方慧and胡家伟2000；顾丽华，平原et al.2003；巴华杰，刘冰泉et al.2007；陈荣华，宋清et al.2007)。其主要的技术包括：

1、采用蒸馏水进行DNA样品采集。对于汗潜指纹DNA采用二步擦拭法采集DNA。即先用 蘸有蒸馏水的棉条擦拭一次，再用干棉条擦拭一次，将两次回收的样品合并用于下面 的DNA提取、纯化。

2、采取5％Chelex-100或5％Chelex-100与Microcon-100浓缩柱联合提取DNA。

3、在STR-DNA扩增条件方面，主要采用Profiler Plus(美国ABI公司)试剂盒的10ul 扩增体系。

目前的技术在实际应用中，对于水溶性样本的检出率较高，如从现场遗留的血痕，体 液痕迹(郑会芬，董研et al.2006)，甚至吃剩的食物上可以检测到罪犯的DNA(张晓红， 唐建新et al.2006)，然而对于不同材质上残留的汗潜指纹的DNA检测尤为困难(顾丽华， 平原et al.2003；董研，张晨et al.2006)。而汗潜指纹则是犯罪现场最常留下的法 医物证，对这一样品DNA的成功检出可以极大地提高法医物证DNA的检出率。

前期现场DNA样品采集技术的限制，大大影响了痕量DNA，特别是汗斑指纹DNA的检 出效率。

参考文献：

1、巴华杰，刘冰泉，et al.(2007).″Chelex-100法提取滤纸血痕DNA影响因素的比较.″法医学杂志23(5)：347-348.

2、方慧and胡家伟(2000).″用Chelex-100提取骨骼DNA的研究.″刑事技术(2)：16-17.

3、步嵘and王耀平(1999).″以Chelex100为介质抽提DNA.″中华病理学杂志28(5)：379-380.

4、董研，张晨，et al.(2006).″汗潜指印的str分型检测在案件中的应用.″法医学杂志22(1)：74-75.

5、张晓红，唐建新，et al.(2006).″Chelex-100法在微量检材DNA检验中的应用2例.″广东公安科技(3)： 69-70，72.

6、郑会芬，董研，et al.(2006).″现场散布血迹dna检案1例.″法医学杂志22(2)：129-129.