[发明专利]一种采集、回收痕量DNA的试剂及试剂盒和应用方法无效
| 申请号: | 200810233535.8 | 申请日: | 2008-11-06 |
| 公开(公告)号: | CN101397588A | 公开(公告)日: | 2009-04-01 |
| 发明(设计)人: | 罗瑛;柳海涛;唐文如;李安;史斌 | 申请(专利权)人: | 昆明理工大学 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 昆明正原专利代理有限责任公司 | 代理人: | 金耀生 |
| 地址: | 650093云南*** | 国省代码: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 采集 回收 痕量 dna 试剂 试剂盒 应用 方法 | ||
1.一种采集、回收痕量DNA的试剂,其特征在于该试剂主要由pH缓冲体系,盐离子, 表面活性剂,螯合树脂,蛋白酶组成,pH缓冲体系为Tris-HCl,盐离子为MgCl2和KCl 或MgCl2和NaCl,表面活性剂为非离子去污剂NP-40和吐温20或NP-40和TritonX-100, 鳌合树脂为Chelex-100,用量配比为:Tris-HCl 10-30mM,pH 8.0,KCl或NaCl 10-50mM, MgCl20.5-2mM,吐温20或TritonX-1000.2-1%(v/v),NP-400.2-1%(v/v),Chelex-100 5%(w/v),使用前新鲜加入0.4-1mg/ml蛋白酶K。
2.权利要求1所述的采集、回收痕量DNA的试剂,其特征在于用该试剂制成的试剂盒。
3.权利要求1所述的采集、回收痕量DNA的试剂的应用方法,其特征在于按以下步骤进 行:
1)依据采集面积的大小,取10ul-20ul权利要求1所述的采集、回收痕量DNA的试剂 到eppendorf管,取一条棉条放入润湿,取出棉条,擦拭待采集部位,连棉条一起回收 到eppendorf管中;
2)55℃恒温箱温育2-3小时;
3)离心带棉条的eppendorf管,取1-5ul上清用于后续的DNA扩增等分析技术;
4)-20℃保存剩余的样品,以备后用。
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