[发明专利]用于检测烟草根黑腐病菌的引物、探针及实时荧光PCR试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测烟草根黑腐病菌的引物，它包括正向引物Tb1和反向引物Tb2组成的引物对，所述正向引物Tb1的核苷酸序列见序列表中的序列1所示，Tb1：5’-ACC ATATGT GAA CGT ACC TTT TCT-3’；所述反向引物Tb2核苷酸序列见序列表中的序列2所示，Tb2：5’-AGT TTA TAA ATG CTA CCG GCA GAA-3’。

2.一种用于检测烟草根黑腐病菌的探针，所述探针的核苷酸序列是序列表中的序列3、序列4或序列5所示的序列；其荧光报告基团标记在5’端，荧光淬灭基团标记在3’端，构成荧光标记探针。

3.一种检测烟草根黑腐病菌的试剂盒，包括权利要求1所述的引物和权利要求2所述的探针。

4.根据权利要求3所述的检测烟草根黑腐病菌的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括待测样品提取试剂、定量标准品、实时荧光PCR反应液和检测用品，所述实时荧光PCR反应液包括有如下的组份及其相对应的终浓度：PCR缓冲液：10％；MgCl₂：2.6mmol/L；dNTPs：0.2mmol/L；Taq DNA聚合酶：1U/20μL；正向引物Tbl：0.4μmol/L；反向引物Tb2：0.4μmol/L；荧光标记探针：0.4μmol/L；采用无菌超纯水调整终浓度。