[发明专利]一种橡胶树试管苗无菌根体细胞胚发生植株再生方法无效
| 申请号： | 200810226001.2 | 申请日： | 2008-11-03 |
| 公开（公告）号： | CN101411306A | 公开（公告）日： | 2009-04-22 |
| 发明（设计）人： | 周权男;李哲;孙爱花;黄天带;于波;黄华孙;林位夫;汪秀华 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院橡胶研究所 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00;C12N5/04 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人： | 黄慧德 |
| 地址： | 57173*** | 国省代码： | 海南;66 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 橡胶树 试管 菌根 体细胞 发生 植株 再生 方法 | ||
1.一种橡胶树试管苗无菌根体细胞胚发生植株再生方法，其特 征在于，包括如下步骤：
1)根处理：选取橡胶树花药培养经过胚状体发生途径得到的试 管苗的幼根，直径为0.8～1.2mm，切成长度为1.0～1.5cm的根段；
2)胚性愈伤组织的诱导和继代培养：把根段接种于胚性愈伤组 织诱导培养基，暗培养25～40天，诱导出胚性愈伤组织；再转入继 代培养基，暗培养15～30天，培养温度为25～28℃；
3)体细胞胚的诱导：将继代培养后的胚性愈伤组织转移到体细 胞胚诱导培养基，培养温度为25～28℃，暗培养20～50天，诱导出 体细胞胚；
4)植株再生：再将成熟体细胞胚转移到出苗培养基，光照培养， 培养温度为25～28℃，培养20～50天，长成完整植株；
其中，所述胚性愈伤组织诱导培养基为改良的MS培养基，其是 将MS培养基中的无水氯化钙、磷酸二氢钾、四水硫酸锰、七水硫酸 镁的含量调整为无水氯化钙150～400mg/L、磷酸二氢钾350～ 500mg/L、四水硫酸锰15～40mg/L、七水硫酸镁400～600mg/L，并 添加2，4-D 1～5mg/L、KT 1～5mg/L、6-BA 0.5～5.0mg/L、Phytagel 2～ 3g/L、蔗糖50～90g/L、椰子水40～90ml/L；
其中，所述继代培养基为改良的MS培养基，并添加2，4-D 1～ 3mg/L、KT 1～3mg/L、NAA 1～3mg/L、Phytagel 2～3g/L、蔗糖 50～90g/L、椰子水40～90ml/L；
其中，所述体细胞胚诱导培养基为改良的MS培养基中添加6-BA 0.5～2.0mg/L、KT 0.5～3.0mg/L、NAA 0.1～1.0mg/L、GA30.1～ 1.0mg/L、Phytagel 2～3g/L、蔗糖50～90g/L、活性碳1～2g/L、椰子 水40～90ml/L；
其中，所述出苗培养基为改良的MS培养基中添加KT 0.5～ 4.0mg/L、NAA 0.1～1.0mg/L、GA30.1～1.0mg/L、Phytagel 2～3g/L、 蔗糖50～90g/L、活性碳1～2g/L、椰子水40～90ml/L。
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