[发明专利]BiP蛋白抗原表位多肽及其筛选方法与应用

权利要求书

1、一种BiP蛋白抗原表位多肽，其特征在于，是如下(a)或(b)的多肽：

(a)、由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的多肽；

(b)、在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有抗原表位功能的由(a)衍生的多肽。

2、如权利要求1所述的BiP蛋白抗原表位多肽的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

A)选取人全长BiP蛋白基因序列开放阅读框1962nt核酸序列对应的氨基酸序列为对象，采用Standard、Karplus、Emini、Amphiphi、Pellequer五种关于抗原表位预测的标准方法，分析上述654aa长度的BiP蛋白二级结构，确定其抗原决定簇；

B)按抗原趋势指数排列，计算分析得出较好的抗原表位序列，合成候选的若干条多肽，通过免疫检测，筛选得到与类风湿关节炎患者血清IgG抗体反应最强的抗原多肽，即(a)多肽；

C)通过在上述(a)多肽上经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸重新合成一系列多肽，经免疫检测得到类似于步骤B中获得的抗原多肽与类风湿关节炎患者血清IgG抗体反应的多肽及其衍生物，从而得到具有抗原表位活性的(b)多肽，即(a)多肽的衍生物。

3、一种用于检测类风湿关节炎患者血清抗BiP蛋白多肽IgG抗体的免疫学方法，其特征在于：将如权利要求1所述的BiP蛋白表位多肽作为抗原，采用单特异性ELISA法检测类风湿关节炎患者血清抗BiP蛋白多肽IgG抗体。

4、根据权利要求3所述的免疫学方法，其特征在于：所述的ELISA法中，包被缓冲液为pH9.6的0.05mol/L的碳酸盐缓冲液。

5、根据权利要求3所述的免疫学方法，其特征在于：所述的ELISA法中，抗原多肽即所述BiP蛋白表位多肽的包被量为100ng。

6、根据权利要求3所述的免疫学方法，其特征在于：所述的ELISA法中，一抗稀释液和稀释倍数为：含0.2％酪蛋白的Tris-HCl缓冲溶液，pH6.0，稀释100倍。

7、根据权利要求3所述的免疫学方法，其特征在于：所述的ELISA法中，封闭液和封闭条件为：含1％BSA的0.05％吐温的磷酸盐缓冲液，37℃封闭2小时。

8、如权利要求1所述的BiP蛋白抗原表位多肽在制备诊断类风湿关节炎的药物中的应用。

9、含有如权利要求1所述的BiP蛋白抗原表位多肽的诊断类风湿关节炎的试剂盒。